【摘 要】
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背景鼻咽癌是我国高发恶性肿瘤之一,发病率为耳鼻咽喉恶性肿瘤之首。鼻咽癌大多对放射治疗具有中度敏感性,放射治疗是鼻咽癌的首选治疗方法。但是对较高分化癌,病程较晚以及放疗后复发的病例,手术切除属于不可缺少的手段。围手术期麻醉药物可对多种肿瘤预后及转移产生影响。本实验拟以人鼻咽癌细胞系CNE1为细胞模型,体外条件下检测麻醉药物地氟烷对CNE1细胞增殖、凋亡、迁徙能力及低氧诱导分子-1的表达情况,为临床鼻
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背景鼻咽癌是我国高发恶性肿瘤之一,发病率为耳鼻咽喉恶性肿瘤之首。鼻咽癌大多对放射治疗具有中度敏感性,放射治疗是鼻咽癌的首选治疗方法。但是对较高分化癌,病程较晚以及放疗后复发的病例,手术切除属于不可缺少的手段。围手术期麻醉药物可对多种肿瘤预后及转移产生影响。本实验拟以人鼻咽癌细胞系CNE1为细胞模型,体外条件下检测麻醉药物地氟烷对CNE1细胞增殖、凋亡、迁徙能力及低氧诱导分子-1的表达情况,为临床鼻咽癌手术选择更合理的复合麻醉方案提供细胞水平的理论依据。目的探讨地氟烷对CNE1细胞系生物学特性影响,包括细胞增殖、凋亡、迁移能力及HIF-1的表达,为临床鼻咽癌手术选择更合理的复合麻醉方案提供细胞水平的理论依据。方法1.采用MTT法检测不同浓度地氟烷对CNE1细胞增殖能力的影响。2.采用流式细胞术检测不同浓度地氟烷对CNE1细胞凋亡的影响。3.采用transwell检测不同浓度地氟烷对CNE1细胞迁移能力的影响。4.采用q PCR检测不同浓度地氟烷对CNE1细胞低氧诱导分子（HIF-1）m RNA表达的影响。5.采用免疫荧光检测不同浓度地氟烷对CNE1细胞低氧诱导分子（HIF-1）蛋白表达的影响。6.统计方法:计量资料采用（均值±标准差）表示,t检验和配对t检验分别用于比较两组不相关和两组相关数据比较,统计学有差异以p＜0.05为标准。结果1.未加入地氟烷组细胞在OD450处的吸光度为（1.14±0.12）,加入0.1%、0.5%、1%、2%和5%地氟烷后,对应组吸光度分别为（1.19±0.17）、（1.57±0.12）、（2.56±0.26）、（3.02±0.09）和（2.84±0.24）。当浓度达到0.5%-2%浓度范围时,细胞增殖会随着浓度的增加而增加,呈现浓度依赖性。2.未加入地氟烷组表细胞凋亡百分比为（14.77±0.81）%,加入0.5%、1%和2%浓度地氟烷组对应细胞凋亡百分比分别为（9.58±0.66）%、（5.82±1.55）%和（2.97±0.32）%。与对照组相比,地氟烷组细胞凋亡明显受到抑制,且浓度越高抑制越明显,呈现浓度依赖性,各组两两比较均有统计学差异（p＜0.05）。3.未加入地氟烷组细胞数为（15.20±2.86）个,加入0.5%、1%和2%浓度地氟烷组对应基质膜上细胞数分别为（17.20±3.42）个、（23.20±8.10）个和（73.60±21.94）个,相对较低的浓度如0.5%和1%地氟烷虽然能一定程度上促进细胞迁移能力,但无统计学差异。只有较高浓度地氟烷（2%）可以促进CNE1细胞迁移能力,且与对照组及0.5%、1%浓度地氟烷组有统计学差异（p＜0.05）。4.未加入地氟烷组HIF-1 m RNA相对表达量为（1.39±0.16）,加入0.5%、1%和2%浓度地氟烷组对应HIF-1 m RNA相对表达量分别为（1.97±0.46）、（5.19±0.43）和（11.16±1.08）。除了0.5%地氟烷组与对照组相比较之外,其他各组间两两比较均有统计学差异（p＜0.05）。5.在无地氟烷刺激时,CNE1细胞HIF-1表达极低;而加入地氟烷刺激组细胞表明HIF-1表达开始明显增加。对照组MFI值为（581.61±19.22）,加入0.5%、1%和2%浓度地氟烷组对应HIF-1蛋白表达MFI分别为（703.00±65.45）、（1092.00±97.33）和（2352.00±136.09）。与空白对照组相比,地氟烷组HIF-1蛋白表达均增高,且各组间两两比较也有统计学差异（p＜0.05）。结论地氟烷可促进鼻咽癌细胞系CNE1细胞增殖,抑制细胞凋亡,提高其迁移能力,还可促进HIF-1 m RNA及蛋白的表达。
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