microRNA（mi RNA）作为一种内源性非编码RNA与很多疾病基因的表达直接相关。因此,作为一种新型的生物标志物,对其实施快速、超灵敏的检测对于疾病的早期诊断和预后治疗都具有深远的意义。电致化学发光测试技术由于其具备快速的响应效率、超高的灵敏度和极低的背景噪音等优势赢得了科研界的广泛关注。本论文致力于将电致化学发光分析与生物传感器结合起来构建电致化学发光生物传感器,实现对mi RNA的快速检测。为解决ECL信号强度低的问题,引入了不同类型的共反应促进剂参与构建三元ECL发光体系,提高检测的准确性。为解决干扰因子多、背景噪音强等缺陷,采用多种核酸放大手段和CRISPR/Cas系统协同完成靶标的循环扩增和信号的快速切换。并且将传感平台在微流控纸芯片界面实施,大大提高了操作的简便性,降低了实验成本。本文通过制备不同的共反应促进剂,引入了不同的核酸扩增策略,搭建了不同种类的ECL生物传感器以实现对目标物mi RNA的快速检测。主要研究工作如下:（1）构建了基于DNA walker的三元电致化学发光生物传感平台用于mi RNA-141的检测。制备了具有优异导电性能的3D-r GO作为基底,Au Pd NPs以共反应促进剂身份参与到N-（4-氨丁基）-N-乙基异鲁米诺（ABEI）/H2O2体系中。通过一步DNA walker核酸扩增策略构建循环过程,实现靶标浓度的原位积累,提高跟踪分析结果的灵敏度。以电致化学发光手段表征后,佐证了所提出的生物传感器借助超低检测限的优势可实现对mi RNA-141的超灵敏检测。（2）构建了基于CRISPR/Cas12a和3D DNA walker信号放大策略的纸基生物传感器超灵敏检测mi RNA-141。该传感器具有“On-Super On-Off”的信号转换特点。以Au Pd NPs作为共反应促进剂加速g-C3N4 NSs/K2S2O8体系的氧化还原反应。3D DNA walker作为信号放大生物手段,实现中间体DNA的积累和靶标的循环使用。最终CRISPR/Cas12a以其非特异性侧枝切割能力响应信号的转换。所设计的生物传感器对mi RNA-141显示出优良的ECL线性响应。（3）构建了杂交链式反应触发的CRISPR/Cas12a纸基生物传感平台,以检测mi RNA-141。合成了CO3O4@Au NPs多面体作为共反应促进剂参与Ru（bpy）32+/TPr A体系的反应,增强ECL信号。设计了引物触发的杂交链式反应进程进行自身扩增,并采用球形核酸（SNA）携带发光体接枝到电极界面上,进一步扩增信号。最后以CRISPR/Cas12a信号开关实现信号的湮灭。据此构建的生物传感器具有优异的性能,可实现目标物的准确。快速检测。