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目的:微流控芯片具有微尺度,灵活操控等特点,用于胚胎体外培养目前已受到关注。本研究采用表面处理的凹陷结构微流控芯片对异常受精的三原核（3Pronuclear,3PN）胚胎进行体外静态培养。以常规微滴培养为对照组,加入不同浓度（0%,0.2%,1%W/V）的泊洛沙姆407（Pluronic F-127,PF-127）对微流控凹陷结构培养系统进行表面修饰处理为实验组,分析胚胎卵裂率、卵裂期优质胚胎率、囊胚形成率及优质囊胚率,建立表面处理的凹陷结构微流控芯片胚胎体外培养的新平台,为之后开展基于微流控技术胚胎体外复杂培养体系研究做探索。方法:经历25个批次,232个周期数,陆续收集自2020年1月至2021年12月期间就诊于大连市妇女儿童医疗中心生殖中心不孕症患者IVF受精后16～18h观察提示双极体、三原核（3PN）胚胎共280枚。按胚胎的纳入排除标准,排除80枚3PN胚胎,纳入200枚3PN胚胎（120名患者）。每一枚纳入研究的3PN胚胎进行随机抽样编号,1～50号胚胎为对照组,51～100号胚胎为实验组1,101～150号胚胎为实验组2,151～200号胚胎为实验组3。回顾性分析4组胚胎所对应患者的临床基本信息以及实验室资料。将对照组中的3PN胚胎放入常规微滴中培养,3个实验组中的3PN胚胎分别放入经0%PF-127（实验组1）、0.2%PF-127（实验组2）、1%PF-127（实验组3）进行表面修饰处理的凹陷结构微流控芯片中培养。比较分析实验组与对照组的胚胎卵裂率、卵裂期优质胚胎率、囊胚形成率及优质囊胚率。采用Rx64 4.1.2版本对数据进行统计与分析,计量资料采用方差分析和Kruskal-Wallis检验;分类资料及率的比较采用χ2检验,最后对结局指标进行单因素和多因素logistic回归以矫正混杂,进一步验证不同实验组相对于对照组对胚胎发育潜能的影响。以P＜0.05为差异具有统计学意义。结果:1.对照组与各实验组的患者在年龄、不孕类型、不孕年限、体重指数（Body Mass Index,BMI）、促性腺激素（Gonadotropin,Gn）剂量、Gn用药天数、基础激素水平、窦卵泡数、获卵数、正常受精率、异常受精率等无统计学差异。2.对照组与各实验组的患者正常受精2PN胚胎的卵裂率、卵裂期优质胚胎率、囊胚形成率、优质囊胚形成率等无统计学差异。3.胚胎卵裂率:微滴培养（对照组）、0%PF-127（实验组1）、0.2%PF-127（实验组2）、1%PF-127（实验组3）的≥4细胞胚胎卵裂率分别为88.0%、94.0%、98.0%、30.0%。整体存在显著性差异,对照组与实验组3存在显著性差异,而对照组与实验组1及实验组2之间不存在统计学差异;对于≥8细胞胚胎卵裂率,以上4组分别依次为86.0%、92.0%、98.0%、22.0%,整体存在显著性差异,对照组与实验组3存在显著性差异,而对照组与实验组1及实验组2不存在统计学差异;以上4组3PN胚胎的部分融合以上胚胎形成率分别为22.0%、26.0%、58.0%、4.0%,整体存在显著性差异,对照组与实验组2比较存在统计学差异,而在对照组与实验组1及实验组3之间没有发现统计学差异;以上4组囊胚形成率依次为10.0%、18.0%、24.0%、2.0%,整体存在显著性差异,组间结果提示对照组与实验组2和实验组3存在统计学差异。多因素logistic回归结果提示,相对于对照组,0.2%PF-127处理对3PN胚胎的≥8细胞胚胎发育、部分融合以上胚胎发育以及囊胚形成具有促进作用,1%PF-127处理则对3PN胚胎的≥4细胞胚胎、≥8细胞胚胎、部分融合以上胚胎及囊胚形成率均有显著的抑制作用。4.卵裂期优质胚胎率:微滴培养、0%PF-127、0.2%PF-127、1%PF-127的卵裂期优质胚胎率分别为12.0%、18.0%、38.0%、0.0%,整体存在显著性差异,对照组与实验组2组间存在统计学差异,而对照组与实验组1及实验组3无统计学差异。多因素logistic回归结果提示,实验组2相对于对照组可促进3PN胚胎的卵裂期优质胚胎发育,而实验组1及实验组3相对于对照组,对3PN胚胎的卵裂期优质胚胎发育没有明显影响。5.优质囊胚率:微滴培养、0%PF-127、0.2%PF-127、1%PF-127的优质囊胚率分别为6.0%、8.0%、10.0%、0.0%,整体存在统计学差异,而组间比较发现对照组与实验组1、实验组2、实验组3之间均无统计学差异。多因素分析结果与上述结果一致。结论:1.对比常规微滴培养对照组,0.2%PF-127实验组培养3PN胚胎可以提高胚胎卵裂率、卵裂期优质胚胎率。说明本实验设计的凹陷结构微流控芯片用0.2%PF-127处理后可以用于静态胚胎体外培养,并较常规微滴培养有一定优势,为胚胎体外培养提供一种新的思路。2.对比常规微滴培养对照组,0%PF-127实验组对胚胎卵裂率、卵裂期优质胚胎率及优质囊胚率均没有增加或降低效应。说明凹陷结构微流控芯片对胚胎培养与常规微滴培养的效果类似。3.对比常规微滴培养对照组,1%PF-127实验组的≥4细胞、≥8细胞、部分融合以上胚胎及囊胚形成率均显著降低,且卵裂期优质胚胎率和优质囊胚率均为0,提示1%PF-127处理凹陷结构微流控芯片可能对胚胎发育产生一定的毒性或危害作用,不利于胚胎的发育。