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研究背景:在心血管疾病中,心肌梗死（Myocardial infarction,MI）的发病率和致死率都排在前位,目前治疗上主要采用介入治疗使冠脉恢复血供,发生过MI的患者治疗与否后期仍有一部分人最终发展成为心力衰竭,而心室重构（Ventricular remodeling,VR）是心力衰竭发展中的一个必经过程,MI后VR是影响预后的重要因素之一。机体受多方面因素的调节,目前关于心梗后心室重构发病机制的研究大致分为神经体液调节异常、氧化应激、心肌纤维化、细胞凋亡和自噬、炎症反应、血管内皮功能障碍等几种,临床上用来治疗MI后VR的药物主要针对神经体液调节异常和内皮功能障碍。近些年来中药提取物在治疗心血管疾病上为我们提供了很多新的思路,丹皮酚作为其中一种,具有抗氧化应激、抗凋亡、抗纤维化、抗炎等多种药理作用,在心血管相关疾病的研究上发挥一定疗效,目前单独使用丹皮酚治疗通过结扎前降支的的方法制作的MI后VR的研究尚未涉及,需要进一步研究来明确。实验目的:研究丹皮酚是否能减轻小鼠MI后VR,并探索可能的作用机制。实验方法:（1）体内实验:手术结扎C57BL/6小鼠冠状动脉前降支制作MI模型,假手术组采用缝针穿过前降支不结扎,将造模成功的小鼠随机分为4组,假手术组（磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffered Saline,PBS）腹腔注射）,模型组（PBS腹腔注射）,低剂量丹皮酚组（50mg/kg）,高剂量丹皮酚组（100mg/kg）,腹腔连续给药4周后小鼠行二维超声心动图检查常规左心功能,取材观察小鼠心脏体重指数（Heart weight to body weight index,HWI）变化,离体的心脏组织取乳头肌水平及以下的梗死的组织固定切片用来做马松染色观察心肌纤维化程度,末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定（terminal dexynucleotidyl transferase（Td T）-mediated d UTP nick end labeling,TUNEL）免疫组化染色观察心肌细胞凋亡情况,麦胚凝集素（Wheat germ agglutinin,WGA）免疫荧光染色观察心肌细胞大小变化,取靠近梗死边缘区的非梗死区组织应用免疫蛋白印记（Western bloting,WB）方法检测心肌组织中纤维化、凋亡、NADPH氧化酶（NADPH oxidase,NOX）家族蛋白表达的变化。根据NOX家族蛋白的实验结果,经过丹皮酚治疗后的心梗小鼠NOX2较模型组明显降低,应用NOX2抑制剂（GSK2795039,GSK）设置三组实验小鼠:假手术组(（PBS）、模型组（PBS）、NOX2抑制剂组（100mg/kg）,腹腔给药15天,后小鼠行二维超声心动图检查常规左心功能,取材观察小鼠心脏体重指数（Heart weight to body weight index,HWI）变化,离体的心脏组织取乳头肌水平及以下的梗死的组织固定切片用来做马松染色观察心肌纤维化程度,末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记测定（terminal dexynucleotidyl transferase（Td T）-mediated d UTP nick end labeling,TUNEL）免疫组化染色观察心肌细胞凋亡情况,麦胚凝集素（Wheat germ agglutinin,WGA）免疫荧光染色观察心肌细胞大小变化,。（2）体外实验:体外用L型去甲肾上腺素（norepinephrine,NE）2um刺激H9C2大鼠心肌细胞系和原代小鼠心肌细胞制作体外重构模型,应用丹皮酚和GSK处理。用鬼笔环肽染H9C2细胞肌丝,心肌肌钙蛋白T（Cardiac troponin T,c TNT）抗体染原代心肌细胞确定细胞大小。实验结果:（1）体内实验结果:从超声检查看出高剂量丹皮酚和NOX2抑制剂,改善MI小鼠的左室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）和左室短轴缩短率（left ventricular fraction shortening,LVFS）,升高左室舒张末期内径（left ventricular internal diameter at diastole,LVIDD）和左室收缩末期内径（left ventricular internal diameter at systolic,LVIDS）,差异有统计学意义。高剂量丹皮酚和NOX2抑制剂能降低MI小鼠HWI,组织切片相关相关病理学检测发现,和假手术组相比,模型组心肌细胞大小、纤维化百分比、TUNEL凋亡阳性信号百分比升高;和模型组相比较,高剂量丹皮酚组和NOX2抑制剂组减少心肌细胞大小、纤维化百分比、TUNEL凋亡阳性信号;WB检测观察到高剂量丹皮酚能够有效降低心肌组织减少I型和III型胶原沉积,降低MI后NOX2的表达水平,差异具有统计学意义。（2）体外实验结果:细胞爬片免疫荧光结果提示丹皮酚和NOX2抑制剂能够缓解NE导致的H9C2大鼠心肌细胞系和原代心肌细胞面积增大。。实验结论:丹皮酚能够部分改善MI后左心功能和VR。它的作用机制与纤维化、NOX参与的氧化应激有关,NOX2在丹皮酚的治疗作用中发挥重要作用。