【摘 要】
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目的:研究根皮苷（PHZ）对力竭性运动模型小鼠的抗疲劳作用及其可能的作用机制。方法:通过力竭游泳建立小鼠的疲劳模型,采用简单随机法将SPF级雄性C57BL/6J小鼠分为6组:正常对照组、模型组、模型+PHZ 2.5 mg/kg组、模型+PHZ 5 mg/kg组、模型+PHZ 10 mg/kg组和模型+PHZ 20 mg/kg组。采用简单随机法将SPF级雄性野生型（WT）小鼠和Nrf2基因敲除型(N
【基金项目】
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遵义市科技创新人才团队（NO:遵市科人才[2021]4号）； 贵州省科技支撑计划（NO:黔科合支撑[2020]1Y010号）；
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目的:研究根皮苷（PHZ）对力竭性运动模型小鼠的抗疲劳作用及其可能的作用机制。方法:通过力竭游泳建立小鼠的疲劳模型,采用简单随机法将SPF级雄性C57BL/6J小鼠分为6组:正常对照组、模型组、模型+PHZ 2.5 mg/kg组、模型+PHZ 5 mg/kg组、模型+PHZ 10 mg/kg组和模型+PHZ 20 mg/kg组。采用简单随机法将SPF级雄性野生型（WT）小鼠和Nrf2基因敲除型(Nrf2-/-)小鼠随机分为4组:WT模型组、WT模型+PHZ组（10 mg/kg）、Nrf2-/-模型组、Nrf2-/-模型+PHZ组（10 mg/kg）。给药组连续灌胃PHZ 28天（2次/天）,正常对照组和模型组给予同体积的生理盐水。通过负重强迫游泳和转棒实验测试各组小鼠的运动能力;分子对接技术分析PHZ与Nrf2的结合能力;ELISA试剂盒检测小鼠血尿素氮（BUN）、肌酸激酶（CK）、乳酸（LA）、肝糖原（LG）和骨骼肌糖原（MG）、活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）水平以及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活力。蛋白免疫印迹法检测WT小鼠的核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶-1（HO-1）和NAD（P）H-醌氧化还原酶-1（NQO-1）,以及细胞凋亡信号通路B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl2）、Bcl2-Associated X的蛋白（Bax）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase 3）的蛋白表达情况。结果:模型组小鼠的强迫游泳时间和转棒停留时间较正常对照组明显减少,而PHZ给药组较模型组小鼠的强迫游泳时间和转棒停留时间明显增加;PHZ给药组小鼠血清中BUN、CK和LA水平明显降低,LG和MG水平明显升高;PHZ通过减少ROS的生成,提高抗氧化酶的活性来平衡氧化还原状态。PHZ不仅增加疲劳小鼠的Bcl2/Bax比值,同时还可降低其cleaved-caspase 3的蛋白水平。此外,PHZ显著促进Nrf2由胞浆转入胞核,并上调其下游抗氧化反应元件（ARE）中HO-1和NQO-1的蛋白表达。分子对接研究结果表明,PHZ能够与Nrf2直接结合,提示PHZ可能通过激动Nrf2发挥其抗疲劳作用。通过在Nrf2-/-小鼠观察Nrf2在PHZ抗疲劳中的作用,研究结果发现,Nrf2-/-模型组小鼠较WT模型组小鼠的强迫游泳时间和转棒停留时间明显减少,Nrf2-/-小鼠较WT模型组小鼠血清中BUN、CK和LA水平明显增加,LG和MG水平明显降低;同时,Nrf2-/-小鼠较WT模型组小鼠血清中ROS和MDA水平明显增加,SOD、CAT和GSH-Px活力明显降低;而PHZ对抗疲劳作用在Nrf2-/-疲劳小鼠中被大部分抵消。结论:PHZ具有抗力竭性运动模型小鼠疲劳的作用,其作用机制与调控Nrf2/ARE信号通路抑制氧化应激损伤有关。
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