【摘 要】
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目的:对藏药灰兜巴的管巢长度及其从管巢中采集到的蜘蛛蜕皮进行分析,以辨析藏药灰兜巴基源蜘蛛;对灰兜巴进行理化分析,促进其开发与利用;利用溶茧酶将不溶性的蛛丝蛋白溶解,制成可被人体吸收利用的可溶性小分子产物,建立酶解工艺,探究其治疗糖尿病及其并发症低蛋白血症的作用效果。方法:通过查阅文献,以及测量管巢长度,观察从灰兜巴中采集的蜘蛛蜕皮的背甲形状,对灰兜巴基源动物进行辨析。利用化学方法对灰兜巴水煎煮液
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目的:对藏药灰兜巴的管巢长度及其从管巢中采集到的蜘蛛蜕皮进行分析,以辨析藏药灰兜巴基源蜘蛛;对灰兜巴进行理化分析,促进其开发与利用;利用溶茧酶将不溶性的蛛丝蛋白溶解,制成可被人体吸收利用的可溶性小分子产物,建立酶解工艺,探究其治疗糖尿病及其并发症低蛋白血症的作用效果。方法:通过查阅文献,以及测量管巢长度,观察从灰兜巴中采集的蜘蛛蜕皮的背甲形状,对灰兜巴基源动物进行辨析。利用化学方法对灰兜巴水煎煮液所含成分进行鉴定,采用2015版《中华人民共和国药典》中的方法,测量灰兜巴的水分、灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物的含量;通过酶解法制备灰兜巴提取物,进行单因素试验和正交试验,确定溶茧酶水解灰兜巴的最佳酶解工艺条件;并对酶解产物进行了TLC分析、以及SDS-PAGE电泳鉴定;应用链脲佐菌素诱导糖尿病的造模方法,开展灰兜巴酶解产物的降糖药理活性实验,通过观察并记录小鼠的精神、活动、毛发、排尿及死亡状况等一般情况;平均摄食量;空腹血糖等对灰兜巴酶解产物的降糖活性进行综合评价。结果:通过查阅文献分析灰兜巴不是菌科植物、红蜘蛛、山蜘蛛、螲蟷科蜘蛛所产蛛网。三地购买的灰兜巴长度的平均值分别为35.46±3.1cm、28.98±2.5 cm和31.25±3.8 cm。经F检验,三组管巢长度没有显著性差异。根据灰兜巴的管巢长度的检测结果,三组管巢长度均远大于15 cm,由此可以推断,灰兜巴的基源为异囊地蛛。化学鉴定,结果显示水煎煮液中含有氨基酸、多糖、生物碱等。通过实验发现,灰兜巴的水分含量在2.79±0.96%～3.03±1.23%,灰分含量为5.28±0.98%～5.58±0.76%,水溶性浸出物为2.48±0.51%～2.79±0.53%,醇溶性浸出物为1.36±0.62%-2.04±0.49%。通过正交实验,得出三个因素对实验的影响因素主次顺序为:温度＞底物浓度＞酶解时间,最佳酶解条件确定为:底物浓度5%,反应度37℃,p H 8.5,反应间270 min;TLC分析与SDS-PAGE检测分析中碱性酶解产物比不完全酶解及酸性酶解产物水解的更为彻底;酶解组的小鼠精神状态明显好转,摄食量相比模型组逐渐减少,体重下降趋势有所减缓,血糖逐渐降低。结论:本课题对灰兜巴基源动物进行了辨析,鉴定灰兜巴的基源动物主要为异囊地蛛,同时指出,药农在采集灰兜巴的过程中,可能会混杂有少量卡氏地蛛的管巢。灰兜巴水煎煮液中可能含有氨基酸、多糖、生物碱等。通过含量测定,发现不同购买地的灰兜巴药材水分、灰分、浸出物含量相对稳定。溶茧酶可以有效水解蛛丝蛋白,并比普通水解酶水解效果好,灰兜巴酶解产物具有降低血糖及稳定糖尿病小鼠体重的作用。
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