细菌溶解产物对肺纤维化小鼠免疫功能影响的研究

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目的:通过观察细菌溶解产物对肺纤维化小鼠免疫功能的影响,探讨小鼠肺纤维化的发病与免疫功能的关系。方法:将24只6-7月龄健康雄性C57BL/6N小鼠(33±5g)随机分为:N.对照组、M.肺纤维化组、P.肺纤维化+泛福舒干预组,每一只小鼠饲养1周后,M、P组用博来霉素溶液(5 mg/kg,60μl混合溶液)气管内注射,制备肺纤维化模型,N组用等体积(60μl)生理盐水气管内注射造模。P组造模后每日每只小鼠经口注入细菌溶解产物溶液0.4m L(其中含1.75mg泛福舒),1次/日。在模型造模后28天处死所有小鼠,保留肺部和周围血液标本,左肺用HE、Masson染色观察小鼠肺组织病理变化;右肺用免疫组化检测CD4+、CD8+含量,q-PCR法检测INF-r、IL-13m RNA的含量;ELISA法检测小鼠血清INF-r、IL-13和Ig A含量。结果:1.肉眼观察:N组双肺平滑,粉红色,质软;M组肺脏外观可见出血点和小结节,呈深红色,弹性差;P组小鼠肺上虽可见出血点和小结节,但均较M组少。2.HE染色及Masson染色:结果提示M组和P组博来霉素造模均成功,但P组小鼠在泛福舒干预下肺纤维化程度较M组明显减轻,且有意义(P<0.05)。3.免疫组化:(1)关于CD4+细胞,P组小鼠肺组织高于M组和N组,M组则低于N组,数据差异具备统计学的价值(P<0.05);(2)关于CD8+细胞,与M组和N组相比,P组肺组织表达水平显著下降,并且M组的表达水平高于N组,结果有意义(P<0.05)。4.ELISA:P组较N组、M组INF-r、Ig A的含量明显增多,P<0.05,差异有意义。M组与N组、P组对应指标相比,IL-13表达增高(P<0.05),结果有意义。5.q-PCR:P组与N组、M组相比,INF-rm RNA的表达明显增多,结果有意义(P<0.001);而IL-13m RNA的表达则明显降低,结果有意义(P<0.001)。结论:免疫机制参与肺纤维化的形成,而细菌溶解产物可提高免疫力,抑制肺纤维化的进展,改善肺功能。
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