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摘要：目的：分析研究肺癌患者使用GVAX治疗前后的外周血树突状细胞的变化，总结树突状细胞对肺癌患者检测的临床意义。
方法：选取2011年8月～2013年7月肺癌患者108例为临床研究对象，并取同期100例健康者为对照组。观察比较健康组、肺癌组患者外周血树突状细胞检测结果。10/例肺癌患者均使用GVAX治疗，观察比较患者治疗前后的外周血树突状细胞变化。
结果：肺癌组患者DC1与DC2均低于健康对照组，组间对比，P<0.05，差异有统计学意义。肺癌患者治疗一个月、三个月，患者DC1与DC2无明显变化，而治疗6个月后，DC1与DC2比较有上升，各指标对比差异明显，P<0.05，差异有统计学意义。
结论：肺癌患者使用GVAX治疗后患者有外周血树突状细胞的变化，但是变化较为缓慢。
关键词：肺癌GVAX治疗树突状细胞外周血树突状细胞
【中图分类号】R4【文献标识码】A【文章编号】1671-8801（2013）11-0055-01
目前临床分析发现，功能最强的专职性抗原递呈细胞为树突状细胞，可以摄取加工递呈抗原，并激活淋巴细胞，控制体内的免疫反应[1]。目前临床将肿瘤特异性抗原、肿瘤相关抗原等使用各种手段修饰DC作为瘤苗[2]，为癌症患者的临床治疗及康复提供了新的治疗方法。本文研究分析了肺癌患者在GVAX治疗前后，其外周树突状细胞的变化及意义，报告如下：
1资料与方法
1.1一般资料。选取2011年8月～2013年7月肺癌患者108例为临床研究对象，并取同期100例健康者为对照组。108例肺癌患者均经过病理检查、影像学检查，且均为非小细胞肺癌，其中男性63例，女45例，年龄最大为81岁、最小为54岁，平均年龄为（64.82±9.21）岁；鳞癌患者69例，腺癌39例；癌症分期为IIIA期39例，IIIB期46例，IV期23例。
健康对照组中，均排除有感染、血液系统疾病，肝肾功能障碍，心肺疾病，自身免疫系统疾病等患者，其中男50例，女50例，年龄最大为80岁、最小为55岁，平均为（63.22±10.48）岁。
两组被检者的基本资料对比，差异均不明显，P>0.05，差异无统计学意义，具有可比性。两组被检者均排除有妊娠期、哺乳期，不能完整临床治疗疗程的患者。
1.2GVAX治疗方法。108例肺癌患者，每次注射2×107细胞，且使用多部位皮内注射的方法，注射部位均在淋巴细胞回流丰富的部位，包括腹股沟区、肱三头肌区。使用多点注射的方法，没点注射0.3ml左右。每周进行一次注射。在治疗期间详细地记录注射的部位和全身反应。
1.3观察指标。对所有被检者均采集1ml的外周血，并防止在肝素抗凝管内，采集100ul的血标本，加入到CD14-PC5单抗、CD33-FITC单抗、CD16-Cy-chrome单抗、HLA-DR-PE单抗内，孵育后加入溶血试剂，再次孵育，并使用生理盐水进行离心洗涤。使用流式细胞仪进行检测，包括DC1和DC2。其中DC1为lin-/HLA-DR+/CD11C+/CD123-；CD2为lin-/HLA-DR+/CD11c-/CD123+[3]。
1.4数据处理。所有试验数据均使用SPSS19.0软件包处理，并确保准确无误。当P<0.05时，表示实验样本差异明显且有统计学意义。外周树突状细胞为计量资料，组间对比方法采用t检验。
2结果
肺癌组患者DC1与DC2均低于健康对照组，组间对比，P<0.05，差异有统计学意义。详细结果见表1。
肺癌患者治疗一个月、三个月，患者DC1与DC2无明显变化，而治疗6个月后，DC1与DC2比较有上升，各指标对比差异明显，P<0.05，差异有统计学意义。详细结果见表2。
3讨论
恶性肿瘤是目前严重威胁人类健康达到一种疾病，而目前临床治疗多采用综合治疗，而免疫治疗是近几年研究的热点，早期激活恶性肿瘤患者强大的抗原递呈能力，并继发免疫能力，是临床抗肿瘤治疗的关键。
从实验结果的表1中我们可以看出，肺癌患者有明显的外周血树突状细胞（DC1、DC2）降低，说明树突状细胞的功能有缺陷，患者抗原递呈能力有所降低，对T细胞的刺激性差，会导致患者体内抗肿瘤的效能降低[4]。且大量临床研究还发现，肿瘤分期与树突状细胞有明显的相关性，患者分期越晚，外周血DC1、DC2的数量越少。同时也提示我们，肿瘤在患者体内的生长时间、肿瘤负荷，直接影响树突状细胞的数量。肿瘤细胞可能会影响机体，导致树突状细胞的分化成熟被抑制，使树突状细胞数量减少[5]。
使用GVAX疫苗对恶性肿瘤进行治疗在临床已经广泛被应用，是一种较为安全有效的肿瘤疫苗。通过局部注射，GVAX瘤苗可以增加局部的炎症反应，并吸引巨噬细胞、多核细胞、树突状细胞的浸润，促进DC等抗原递呈细胞对局部肿瘤细胞做吞噬，进对肿瘤细胞中肿瘤相关抗原、肿瘤特异性抗原做加工和处理，牵引到局部淋巴结，并递呈给T淋巴细胞，产生活化T淋巴细胞[6]。
从表2中我们可以看出，肺癌患者使用GVAX治疗，患者治疗1个月、3个月外周血树突状细胞并无明显变化，P>0.05，差异无统计学意义；而治疗6个月时，肺癌患者外周血树突状细胞则有明显的提高，组间对比，P<0.05，差异有统计学意义。说明肺癌患者使用GVAX治疗，对患者外周血树突状细胞有一定的影响，可以提高治疗效果。
综上所述，肺癌患者使用GVAX治疗后患者有外周血树突状细胞的变化，但是变化较为缓慢，GVAX治疗可以提高患者的免疫系统能力，提高肿瘤治疗效果。
参考文献
[1]杜春娟，于津浦，李慧等.GM-CSF修饰肿瘤细胞疫苗治疗前后肺癌患者Treg的变化及其临床意义[J].中国肿瘤生物治疗杂志，2011，18（5）：473-479
[2]钟华，钟润波，韩宝惠等.低剂量化疗联合树突状细胞生物免疫治疗对小鼠肺部肿瘤微环境的调节机制[J].上海交通大学学报（医学版），2010，30（5）：531-534
[3]郑红刚，朴炳奎，花宝金等.肺瘤平膏及其拆方对Lewis肺癌小鼠树突状细胞影响的实验研究[J].中国中西医结合杂志，2010，30（12）：1288-1291
[4]谢启超，朱波，陈正堂等.IDO基因转染小鼠树突状细胞体外诱导Treg细胞增殖的研究[J].重庆医学，2011，40（20）：1977-1978，1981
[5]李妹，龚选举.肺癌组织中NK、CTL、TIDC的浸润与预后的关系[J].临床与实验病理学杂志，2011，27（10）：1122-1124
[6]张在云，李希德，刘叶等.肺癌细胞裂解物负载对树突状细胞分泌的exosome诱导抗肿瘤作用的影响[J].山东医药，2011，51（31）：4-6
方法：选取2011年8月～2013年7月肺癌患者108例为临床研究对象，并取同期100例健康者为对照组。观察比较健康组、肺癌组患者外周血树突状细胞检测结果。10/例肺癌患者均使用GVAX治疗，观察比较患者治疗前后的外周血树突状细胞变化。
结果：肺癌组患者DC1与DC2均低于健康对照组，组间对比，P<0.05，差异有统计学意义。肺癌患者治疗一个月、三个月，患者DC1与DC2无明显变化，而治疗6个月后，DC1与DC2比较有上升，各指标对比差异明显，P<0.05，差异有统计学意义。
结论：肺癌患者使用GVAX治疗后患者有外周血树突状细胞的变化，但是变化较为缓慢。
关键词：肺癌GVAX治疗树突状细胞外周血树突状细胞
【中图分类号】R4【文献标识码】A【文章编号】1671-8801（2013）11-0055-01
目前临床分析发现，功能最强的专职性抗原递呈细胞为树突状细胞，可以摄取加工递呈抗原，并激活淋巴细胞，控制体内的免疫反应[1]。目前临床将肿瘤特异性抗原、肿瘤相关抗原等使用各种手段修饰DC作为瘤苗[2]，为癌症患者的临床治疗及康复提供了新的治疗方法。本文研究分析了肺癌患者在GVAX治疗前后，其外周树突状细胞的变化及意义，报告如下：
1资料与方法
1.1一般资料。选取2011年8月～2013年7月肺癌患者108例为临床研究对象，并取同期100例健康者为对照组。108例肺癌患者均经过病理检查、影像学检查，且均为非小细胞肺癌，其中男性63例，女45例，年龄最大为81岁、最小为54岁，平均年龄为（64.82±9.21）岁；鳞癌患者69例，腺癌39例；癌症分期为IIIA期39例，IIIB期46例，IV期23例。
健康对照组中，均排除有感染、血液系统疾病，肝肾功能障碍，心肺疾病，自身免疫系统疾病等患者，其中男50例，女50例，年龄最大为80岁、最小为55岁，平均为（63.22±10.48）岁。
两组被检者的基本资料对比，差异均不明显，P>0.05，差异无统计学意义，具有可比性。两组被检者均排除有妊娠期、哺乳期，不能完整临床治疗疗程的患者。
1.2GVAX治疗方法。108例肺癌患者，每次注射2×107细胞，且使用多部位皮内注射的方法，注射部位均在淋巴细胞回流丰富的部位，包括腹股沟区、肱三头肌区。使用多点注射的方法，没点注射0.3ml左右。每周进行一次注射。在治疗期间详细地记录注射的部位和全身反应。
1.3观察指标。对所有被检者均采集1ml的外周血，并防止在肝素抗凝管内，采集100ul的血标本，加入到CD14-PC5单抗、CD33-FITC单抗、CD16-Cy-chrome单抗、HLA-DR-PE单抗内，孵育后加入溶血试剂，再次孵育，并使用生理盐水进行离心洗涤。使用流式细胞仪进行检测，包括DC1和DC2。其中DC1为lin-/HLA-DR+/CD11C+/CD123-；CD2为lin-/HLA-DR+/CD11c-/CD123+[3]。
1.4数据处理。所有试验数据均使用SPSS19.0软件包处理，并确保准确无误。当P<0.05时，表示实验样本差异明显且有统计学意义。外周树突状细胞为计量资料，组间对比方法采用t检验。
2结果
肺癌组患者DC1与DC2均低于健康对照组，组间对比，P<0.05，差异有统计学意义。详细结果见表1。
肺癌患者治疗一个月、三个月，患者DC1与DC2无明显变化，而治疗6个月后，DC1与DC2比较有上升，各指标对比差异明显，P<0.05，差异有统计学意义。详细结果见表2。
3讨论
恶性肿瘤是目前严重威胁人类健康达到一种疾病，而目前临床治疗多采用综合治疗，而免疫治疗是近几年研究的热点，早期激活恶性肿瘤患者强大的抗原递呈能力，并继发免疫能力，是临床抗肿瘤治疗的关键。
从实验结果的表1中我们可以看出，肺癌患者有明显的外周血树突状细胞（DC1、DC2）降低，说明树突状细胞的功能有缺陷，患者抗原递呈能力有所降低，对T细胞的刺激性差，会导致患者体内抗肿瘤的效能降低[4]。且大量临床研究还发现，肿瘤分期与树突状细胞有明显的相关性，患者分期越晚，外周血DC1、DC2的数量越少。同时也提示我们，肿瘤在患者体内的生长时间、肿瘤负荷，直接影响树突状细胞的数量。肿瘤细胞可能会影响机体，导致树突状细胞的分化成熟被抑制，使树突状细胞数量减少[5]。
使用GVAX疫苗对恶性肿瘤进行治疗在临床已经广泛被应用，是一种较为安全有效的肿瘤疫苗。通过局部注射，GVAX瘤苗可以增加局部的炎症反应，并吸引巨噬细胞、多核细胞、树突状细胞的浸润，促进DC等抗原递呈细胞对局部肿瘤细胞做吞噬，进对肿瘤细胞中肿瘤相关抗原、肿瘤特异性抗原做加工和处理，牵引到局部淋巴结，并递呈给T淋巴细胞，产生活化T淋巴细胞[6]。
从表2中我们可以看出，肺癌患者使用GVAX治疗，患者治疗1个月、3个月外周血树突状细胞并无明显变化，P>0.05，差异无统计学意义；而治疗6个月时，肺癌患者外周血树突状细胞则有明显的提高，组间对比，P<0.05，差异有统计学意义。说明肺癌患者使用GVAX治疗，对患者外周血树突状细胞有一定的影响，可以提高治疗效果。
综上所述，肺癌患者使用GVAX治疗后患者有外周血树突状细胞的变化，但是变化较为缓慢，GVAX治疗可以提高患者的免疫系统能力，提高肿瘤治疗效果。
参考文献
[1]杜春娟，于津浦，李慧等.GM-CSF修饰肿瘤细胞疫苗治疗前后肺癌患者Treg的变化及其临床意义[J].中国肿瘤生物治疗杂志，2011，18（5）：473-479
[2]钟华，钟润波，韩宝惠等.低剂量化疗联合树突状细胞生物免疫治疗对小鼠肺部肿瘤微环境的调节机制[J].上海交通大学学报（医学版），2010，30（5）：531-534
[3]郑红刚，朴炳奎，花宝金等.肺瘤平膏及其拆方对Lewis肺癌小鼠树突状细胞影响的实验研究[J].中国中西医结合杂志，2010，30（12）：1288-1291
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[5]李妹，龚选举.肺癌组织中NK、CTL、TIDC的浸润与预后的关系[J].临床与实验病理学杂志，2011，27（10）：1122-1124
[6]张在云，李希德，刘叶等.肺癌细胞裂解物负载对树突状细胞分泌的exosome诱导抗肿瘤作用的影响[J].山东医药，2011，51（31）：4-6