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目的: 本课题在中医辨证论治思想及防治理论指导下,应用急性酒精性肝损伤小鼠模型进行研究,探讨小柴胡汤对急性酒精性肝损伤小鼠肝细胞凋亡及TNF-α、TGF-β1的影响,观察对小鼠生化指标及组织形态学的变化。并与西药水飞蓟素作对照,比较它们之间的优劣,为其被广泛、深入地运用于临床防治酒精肝及研制新药提供实验依据。 方法: 取雄性健康昆明小鼠(19.7g±2.2g)90只,随机分组法分为6组并编号。自第2周起,除空白对照组以等体积的蒸馏水灌胃外,其余各组均每日灌胃给予56度﹙稀释到35度﹚二锅头白酒16ml/kg,每日1次,连续10d。治疗组于造模的同时给予药物,自造模第1天起,每日灌胃相应药液(20ml/kg)或等体积的生理盐水共10d。末次给酒后24h(禁食12h),各组小鼠摘眼球取血,静置,3500转/分钟离心15分钟分离血清,冷藏(40С)备用,检测血清生化指标。并立即脱颈椎处死,剖腹取肝脏,观察大体外观后用滤纸吸干称重,切取新鲜肝脏组织,将肝脏固定于4％多聚甲醛溶液中,留做病理切片,分别做免疫组化检测、光镜检查。 结果: 1.与模型组比较,各防治组及阳性对照组均可不同程度地抑制小鼠ALT、AST活性,差异有统计学意义(P<0.05),其中小柴胡颗粒中剂量组、水飞蓟素治疗组与小柴胡颗粒低剂量组、小柴胡颗粒高剂量组相比,差异有显著性意义(P<0.05),但小柴胡颗粒中剂量组和水飞蓟素治疗组之间,小柴胡颗粒低剂量组和小柴胡颗粒高剂量组之间的差异无统计学意义(P>O.05)。 2.除外空白对照组,其余五组均出现酒精性脂肪变性表现和炎症坏死,病变部位主要在肝小叶中央静脉周围和汇管区,程度严重者可弥漫分布于肝小叶各区,呈现出大泡性脂变和局限性坏死。与模型组比较,水飞蓟素治疗组、小柴胡颗粒高剂量组、小柴胡颗粒中剂量组、小柴胡颗粒低剂量组均可不同程度地减轻脂肪变性和炎症坏死,差异有显著性意义(P<0.05)。 3.水飞蓟素治疗组、小柴胡颗粒中剂量组的TNF-α、TGF-β1阳性率较低,与小柴胡颗粒高剂量组、小柴胡颗粒低剂量组相比差异有显著性意义(P<0.05)。 结论: 1.与模型组比较,小柴胡颗粒高剂量组、小柴胡颗粒中剂量组、小柴胡颗粒低剂量组、水飞蓟素治疗组均可升高小鼠的体重,降低小鼠ALT、AST、TBIL值,减轻酒精性脂肪肝变性和炎症坏死,抑制酒精性肝细胞凋亡中TNF-α、TGF-β1的阳性水平,具有保肝利胆作用。 2.小柴胡颗粒中剂量组与水飞蓟素治疗组在降低TNF-α、TGF-β1阳性率,促进肝细胞再生,减轻肝脏病理表现方面疗效相当,优于小柴胡颗粒高剂量组、小柴胡颗粒低剂量组。 3.酒精性肝损伤的病理过程中,TNF-α、TGF-β1阳性率与肝细胞凋亡程度成正比例关系,是肝细胞凋亡的重要指标。小柴胡汤可能一方面抗氧化损伤,保护线粒体;一方面通过抑制炎症因子和免疫攻击而达到降低TNF-α、TGF-β1水平的目的。