人神经细胞粘附分子及其配体1在肠道病毒71型感染所致手足口病中的表达

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目的:探讨EV71感染手足口病患儿血清中的神经细胞粘附分子(CD56+)及其配体1(CD171)的表达情况,从而推测EV71感染手足口病患儿在固有免疫阶段NK细胞在机体,特别是在中枢神经系统的表达情况,进一步对NK细胞在EV71感染手足口病患儿的固有免疫阶段免疫应答情况及在EV71免疫逃逸过程中,特别是对EV71感染中枢神经系统过程中,是否发挥作用及其原因做出推论,从分子免疫学角度为EV71感染人体后早期病理生理过程,特别是中枢神经系统病理生理变化提供客观事实依据,从病理生理学的角度解释EV71感染手足口病患儿中枢神经系统症状的出现原因,为预测EV71感染手足口病患儿疾病严重程度,特别是中枢神经系统感染严重程度及预后评估开拓新的思路,为未来应用生物制剂进行特效治疗EV71感染提供了新的思路及理论基础。方法:参考患儿年龄段、发病时间、是否进行院前处理、出生史、喂养史、生长发育史、既往病史、预防接种史、家族史、近期传染病接触史、居住地情况、居住环境情况、饮食习惯、作息时间、家庭经济情况、看护家属受教育程度等条件选择EV71感染手足口病患儿共60例。入选患儿均为1-3岁,发病时间1-3日,未进行院前处理,整体男女性别比例1:1,无特殊个人史、既往史及家庭情况。依照《肠道病毒71型(EV71)感染重症病例临床救治专家共识(2011年版)》将60例EV71感染的手足口病患儿分为重型病例、普通病例组,另选同一采样时期,相同年龄段,相似个人情况、家族情况及家庭环境的正常健康儿童30例为对照组,所有儿童均空腹4-6小时采集静脉血样本,采集血样手法相同,应用的采集管及采血针均为同一厂家同一批次,采集过程中患儿无剧烈哭闹,均为一次采集成功,所有EV71感染手足口病患儿均在治疗前采集血样,所有采集血样均为正常静脉血样标本,样本离心后无溶血情况,离心后30分钟内采集血清0.5毫升,严格按照CD56+、CD171试剂盒使用说明书,将血清样本进行零下20℃冷藏,无反复冻融操作,检测前血清复温至室温,采用ELISA双抗体夹心法测定技术检测各组静脉血清CD56+、CD171水平,依照CD56+、CD171试剂盒附带的标准品检测结果绘制检测曲线,依据标准曲线计算各检测样品检测物浓度。采用spss13.0软件进行统计分析,计量资料以x?s表示,组间比较用秩和检验和单因素方差分析。结果:重型病例患儿CD56+(24.67±2.41ng/L)及普通病例患儿CD56+(36.53±0.92ng/L)较健康患儿CD56+(40.10±1.31ng/L)水平降低,各组之间两两进行比较,均有统计学意义。重型病例患儿CD171(16.53±1.70ng/L)及普通病例患儿CD171(24.05±0.69ng/L)较健康患儿CD171(27.25±0.71ng/L)水平降低,各组之间两两进行比较,均有统计学意义。结论:EV71感染手足口病患儿存在NK细胞异常情况,EV71感染手足口病患儿NK细胞较正常健康儿童数量减少,活性降低,且与患儿疾病严重程度呈正相关,中枢神经系统NK细胞较正常健康儿童数量减少,活性降低,并且与患儿出现相应中枢神经系统症状呈正相关,初步提示NK细胞在EV71感染手足口病患儿的固有免疫阶段呈数量减少,活性降低,影响NK细胞的免疫应答(包括抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用、天然细胞毒性及产生细胞因子能力),从而降低机体对EV71感染免疫防御能力。NK细胞数量及活性下降,在EV71感染机体后免疫逃逸过程中发挥一定辅助作用,特别是对中枢神经系统感染产生影响。从分子免疫学角度提示NK细胞活性降低,合成、产生细胞因子能力下降,为EV71早期感染人体后各种细胞因子水平变化提供了NK细胞相关的论据,特别是为中枢神经系统病理生理变化提供了分子免疫学水平的理论支持,以细胞因子作为出发点,从病理生理学的角度揭示了EV71感染手足口病患儿中枢神经系统症状出现的原因,为预测EV71感染手足口病患儿的全身免疫应答情况,预测手足口病的严重程度,特别是中枢神经系统感染的严重程度及疾病预后评估提供了小数据样本研究的实例,为大数据样本进一步深入研究开拓了思路,提供了相关联的理论支持,为将来应用生物制剂以更大范围募集和活化NK细胞,从而增强固有免疫,有效早期及时治疗EV71感染手足口病提供了新的思路及理论基础,为彻底解决EV71感染手足口病不同程度流行过程中涉及的临床甄别疾病轻重程度及临床治疗的问题提供了更为广泛的思路。
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