衰老和脂多糖对小鼠眼球P2X7受体及其变异体表达的影响

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目的:了解衰老和脂多糖对小鼠眼组织P2X7R及其变异体表达的影响,为进一步研究P2X7R在衰老和炎症相关疾病中的作用提供理论依据和参考。方法:年轻(4月龄)和年老(18月龄)的C57BL/6雄性鼠腹腔注射0111:B4大肠杆菌LPS 0.5mg/kg (LPS组)或生理盐水(对照组),0、3、24、48或72h后处死。检测炎症因子(IL-1β, IL-18, IL-6, TNF-a)和P2X7R及其变异体的mRNA表达水平及P2X7R蛋白表达水平。结果:1、衰老对眼组织IL-1β、IL-18、IL-6和TNF-a mRNA表达的影响:年老鼠对照组24h和72h IL-1p和TNF-a mRNA表达;24、48和72h IL-18mRNA表达;3、24、48和72h IL-6 mRNA表达均高于年轻鼠对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。2、衰老对眼组织P2X7R-V1、P2X7R-V2、P2X7R-V3和P2X7R-V4表达的影响:未刺激年老鼠P2X7R-V2和P2X7R-V4 mRNA表达高于年轻鼠,差异有统计学意义(P<0.05)。年老鼠对照组3、24、48和72h P2X7R-V1、 P2X7R-V2、P2X7R-V3和P2X7R-V4 mRNA表达均高于年轻鼠对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。未刺激年老鼠P2X7R蛋白表达水平(0.118±0.034)是年轻鼠(0.052±0.004)的2.27倍。年老鼠对照组3、24、48和72h P2X7R蛋白表达均高于年轻鼠,且在3h和24h差异有统计学意义(P<0.05)。3、LPS对年轻鼠眼组织IL-6和TNF-α mRNA表达的影响:LPS在72h上调IL-1βmRNA表达、在3h上调IL-6 mRNA表达,差异均有统计学意义(P<0.05)oLPS在各个时间点对IL-18和TNF-α mRNA表达均无影响,差异无统计学意义(P>0.05)。4、LPS对年轻鼠眼组织P2X7R-V1、P2X7R-V2、P2X7R-V3和P2X7R-V4表达的影响:LPS在3h和72h上调P2X7R-V1 mRNA表达;在48h和72h上调P2X7R-V2 mRNA表达;在3h和24h上调P2X7R-V3 mRNA表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。LPS组与对照组各个时间点P2X7R-V4 mRNA表达差异均无统计学意义(P>0.05)。LPS处理后24h, P2X7R蛋白表达有增高的趋势,但在其它时间点对P2X7R蛋白表达影响不大(P<0.05)。5、LPS对年老鼠眼组织IL-1β、IL-18、IL-6和TNF-α mRNA表达的影响:LPS在24h下调IL-1β、IL-18 mRNA表达;在72h下调TNF-α mRNA表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。LPS组和对照组的IL-6 mRNA表达差异在各个时点均无统计学意义(P>0.05)。6、LPS对年老鼠眼球P2X7R-V1、P2X7R-V2、P2X7R-V3和P2X7R-V4表达的影响:LPS在24h下调P2X7R-V1 mRNA表达;在3h和24h下调P2X7R-V3和P2X7R-V4 mRNA表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。LPS在各个时间点对P2X7R-V2 mRNA表达均无影响,差异无统计学意义(P>0.05)。LPS组P2X7R蛋白表达均低于对照组,只是差异无统计学意义(P>0.05)。7、年轻鼠LPS组与年老鼠LPS组眼组织IL-1β、IL-18、IL-6和TNF-a mRNA表达的比较:年老鼠48h IL-1β mRNA、24h IL-18 mRNA、24h和48hIL-6 mRNA表达均高于年轻鼠,差异均有统计学意义(P<0.05)。8、年轻鼠LPS组与年老鼠LPS组眼组织P2X7R-V1、P2X7R-V2、 P2X7R-V3和P2X7R-V4表达的比较:年老鼠P2X7R-V1 mRNA表达在24h高于年轻鼠、P2X7R-V2 mRNA表达在24h和72h均高于年轻鼠、P2X7R-V3和P2X7R-V4 mRNA表达在24、48和72h均高于年轻鼠,差异均有统计学意义(P<0.05)。年老鼠LPS组各个时点的蛋白表达水平都高于年轻鼠,只是差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1、体内衰老上调眼组织中P2X7受体及其剪接变异体的表达。2、LPS差异性调节年轻鼠和年老鼠的P2X7受体及其剪接变异体的表达。
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