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HLA I类分子表达异常是肿瘤逃逸免疫监视的重要机制之一,MHC I类相关分子(MIC)在肿瘤免疫监视功能中也起着重要的作用。本研究探讨了新鲜肝癌组织和肝癌细胞系中非经典HLA I类分子HLA-G、HLA-E以及MHC I类相关分子MICA、MICB的表达情况,并分析了新鲜肝癌组织中这些分子的表达与临床资料的关联性,为研究肝癌中非经典HLA I类及MIC分子的异常表达机制提供理论依据；同时,我们比较了RNA干扰DNA甲基化转移酶3A或3B的肝癌细胞系SMMC7721后HLA-G、HLA-E、MICA以及MICB分子的mRNA表达情况。结果表明：
1.应用半定量RI-PCR技术在43例肝癌组织中检测到8例肿瘤组织表达HLA-G,表达率为19％。而对应癌旁组织仅1例检测到HLA-G的表达。采用Western Blot技术检测发现8例表达HLA-G mRNA的肝癌组织中,7例检测到HLA-G蛋白表达,而检测到HLA-G mRNA表达的1例癌旁组织未检测到HLA-G蛋白。8株肝癌细胞系均未检测到HLA-G mRNA和蛋白。
2.对43例肝癌及对应癌旁组织的HLA-E表达分析,结果显示肝癌组织中HLA-E mRNA表达较癌旁组织有上调趋势,表现为58％肿瘤标本中的HLA-E mRNA分子表达上调。但是HLA-E分子蛋白表达与mRNA表达不同,呈下调趋势,下调率为52％。对8株肝癌细胞系和1株肝癌癌旁细胞系中HLA-EmRNA和蛋白的研究,发现细胞系与肝癌组织中HLA-E mRNA分子表达上调而蛋白表达下调这一现象一致。乙型肝炎病毒感染细胞模型HepG2.2.15与肝癌细胞系HepG2比较,HLA-E mRNA和蛋白表达均下调。
3.对肝癌、肝癌癌旁组织中MICA/B的mRNA及蛋白表达水平的研究,发现肝癌中MICA、MICB表达上调,MICA、MICB mRNA在肿瘤组织中上调率分别为38％和36％,MICA、MICB蛋白在肿瘤组织中上调率均为38％。RT-PCR研究结果显示8株肝癌细胞系中仅细胞系HepG2.2.15表达MICA、HepG2细胞系表达MICB,其他各细胞系均未发现MIC分子的表达。
4.比较RNA干扰DNA甲基化转移酶3A或3B的肝癌细胞系SMMC7721后HLA-G、HLA-E、MICA以及MICB分子的表达情况无显著变化。
以上结果提示：肝癌中非经典HLA I类分子HLA-G、HLA-E以及MHC I类相关分子MICA、MICB存在不同程度的表达上调。对新鲜肝癌组织和肝癌细胞系中HLA-E的表达研究发现,HLA-E mRNA表达有上调趋势,但是Western Blot结果发现HILA-E蛋白表达下调,转录水平和翻译水平存在明显差异,提示HLA-E的表达调控不仅发生在基因转录之前,转录后调控在肝癌发生发展过程中可能也发挥一定的作用。DNMT3A或DNMT3B沉默以后并没有发现非经典HLA I类及MHC I类相关分子有明显变化,提示在肝癌中DNA甲基化可能没有参与对HLA-G、HLA-E、MICA以及MICB分子异常表达的调控。