BMP7在宫颈癌中的表达及敲低BMP7表达后对HeLa细胞上皮间质转化的抑制作用

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背景:宫颈癌是最常见的女性生殖道恶性肿瘤,在全球,发病率和死亡率居女性生殖道恶性肿瘤的第一位。其最主要的病因是高危型人乳头瘤病毒持续感染。临床上,彻底的手术辅以放疗或放化疗结合的方式为其最主要的治疗方式。然而晚期宫颈癌无法进行彻底的手术,有复发率高、预后差、局部浸润和远处转移的特点,治疗效果差。寻找其他有效的治疗方法也较为重要。BMP家族尤其是BMP7在各种恶性肿瘤的研究中被证实可以调控癌细胞的增殖、侵袭和迁移,但其在宫颈癌中的表达及意义尚未被证实。目的:研究在宫颈癌组织中BMP7的表达及临床意义;研究敲低BMP7表达对宫颈癌HeLa细胞的增殖、侵袭、迁移能力的影响,探究这一影响与BMP7/Smad1/5/9信号通路之间的关系。方法:选取宫颈癌组织、癌旁组织及非宫颈癌组织,用免疫组织化学法检测BMP7在这些组织中的表达,并进行对比。慢病毒转染敲低HeLa细胞BMP7表达,利用Western blot法验证BMP7的敲低,进一步检测对BMP7/Smad信号通路下游Smad1/5/9、p-Smad1/5/9的表达的影响,对上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白 epithelial-Cadherin(E-Cadherin),neural-Cadherin(N-Cadherin).Vimentin,Snail and Slug 的表达的变化;通过 CCK-8 法检测对HeLa细胞的增殖的影响;Transwell侵袭和迁移实验法检测对HeLa细胞的侵袭和迁移能力的改变;流式细胞技术进行对HeLa细胞周期的影响检测。结果:BMP7在宫颈癌组织中的表达高于宫颈癌旁组织(P<0.0001)。与正常宫颈上皮组织相比,BMP7在癌组织中的阳性表达显著增高(P<0.0001)。BMP7在不同宫颈癌组织FIGO分期或病理分级间表达无统计学差异。慢病毒转染敲低HeLa细胞的BMP7表达后,Smad1/5/9蛋白的表达无明显变化,p-Smad1/5/9蛋白表达显著降低(P<0.05);EMT相关蛋白N-Cadherin(P<0.01),Vimentin(P<0.001),Snail and Slug(P<0.01)的表达降低,E-Cadherin(P<0.01)的表达升高;细胞增殖速度减慢(P<0.05);G1期细胞周期阻滞(P<0.01);细胞侵袭和迁移能力降低(P<0.01)。结论:BMP7在宫颈癌组织中高表达,BMP7可能在宫颈癌的发生发展中发挥作用。敲低BMP7表达后,HeLa细胞的增殖、侵袭、迁移能力减弱;这一作用可能是由于BMP7/Smad1/5/9信号通路受阻而导致。
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