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目的:研究丰富环境刺激对脑瘫大鼠脑发育的影响。
方法:1、脑瘫动物模型的制备:给28只孕16、17天大鼠腹腔注射脂多糖(LPS)350ug/kg,连续两天注射,孕22天前分娩的为LPS早产组,孕22-23天分娩的为LPS足月产组,正常对照组的8只孕鼠注射等剂量的生理盐水。2、神经行为学检测:对15日龄LPS早产组、LPS足月产组、正常对照组和42日龄干预组、非干预组、正常对照组分别进行随意运动、姿势、肌张力、不自主运动、情感行为能力、倾斜板试验等检测,记录各项评分并进行统计学分析。3、病理及免疫组化检测:各组24h新生大鼠做常规HE染色,观察脑白质损伤的情况。15日龄、42日龄各组分别做BDNF表达的检测,高倍镜下观察每个视野的阳性细胞数,计数并进行统计学分析。4、丰富环境刺激:15日龄干预组脑瘫大鼠对予7日早期触摸和20日丰富环境刺激,非干预组、正常对照组常规饲养27日。5、学习记忆能力的检测:利用三等分迷宫试验仪检测42日龄各组大鼠学会逃避电击的能力,并检测24h后记忆逃避电击的能力,分别计数并进行统计学分析。
结果:1、LPS早产组共有18只脑瘫大鼠,LPS足月产组、正常对照组中无脑瘫大鼠。2、LPS早产大鼠脑损伤病理变化以脑白质损伤为主。3、神经行为学检测:15日龄大鼠LPS早产组分别与正常对照组、LPS足月产组各项指标相比较,除不自主运动差异无显著性外(P>0.05),其他各项指标差异均具有显著性(P<0.05或P<0.01);LPS足月产组与正常对照组各项指标相比较差异均无显著性(P>0.05);干预组与非干预组相比较悬吊试验、斜坡试验、旷场试验、拒俘试验能力(或得分)差异均具有显著性(P<0.05或P<0.01),姿势、肌张力、不自主运动得分差异无有显著性(P>0.05);干预组与正常对照组相比较悬吊试验、不自主运动、旷场试验、拒俘试验能力差异无显著性(P>0.05),斜坡试验、姿势、肌张力差异有显著性((P<0.05或P<0.01);4、学习记忆能力:学习能力干预组与非干预组相比较差异具有非常显著性(P<0.01),与正常对照组相比较差异具有显著性(P<0.05);记忆能力干预组与非干预组相比较差异具有非常显著性(P<0.01),与正常对照组相比较差异无显著性(P>0.05)。5、BDNF表达:15日龄正常对照组与脑瘫人鼠相比较差异无显著性(P>0.05);42日龄干预组分别与非干预组、正常对照组相比较差异均具有非常显著性(P<0.01)。
结论:宫内感染能够成功制备CP动物模型;宫内感染致早产病理变化主要是脑白质损伤;神经行为学检测能够准确鉴定CP动物模型;对脑瘫大鼠进行环境刺激能够使干预组较非干预组肌力、兴奋性、环境适应能力、记忆能力明显增强,达到正常化水平;干预组较非干预组的平衡能力、协调能力、学习能力(或得分)明显增强,但未达到正常化水平;干预组BDNF表达较非干预组、正常对照组明显增加;未能改善姿势、肌张力、不自主运动的能力(或得分)。