哮喘是以气道高反应性和慢性气道炎症为特征的变态反应疾病。Th1/Th2平衡失调,即Th1功能下降,Th2功能亢进是目前比较公认的哮喘免疫学发病机制。由于特异性调控Th0细胞向Th2分化,STAT6基因成为治疗哮喘的靶基因。目前尚未报道STAT6基因的高效特异性的SiRNA序列,因此本研究选择STAT6基因作为RNA干扰(RNA interference,RNAi)的靶点,构建STAT6干扰质粒,为哮喘的治疗研究提供新思路。目的:构建针对STAT6基因的干扰质粒,并观察其对STAT6蛋白表达的抑制效果。方法:通过体外转录合成shRNA,与pIRES2– EGFP– STAT6基因表达质粒共同转染COS7细胞,在荧光显微镜下观察干扰效果,同时从蛋白水平对干扰质粒的抑制效果进行验证。结果:将pIRES2– EGFP– STAT6重组载体转染COS7细胞后,结果显示STAT6蛋白可以在细胞中高水平表达。与正常对照组相比,pGenesil3-STAT61和pGenesil3-STAT62对STAT6蛋白的抑制率分别是74.3%和85.8%,其中pGenesil3-STAT62的抑制作用更为显著。结论:成功构建并筛选到具有显著干扰效率的STAT6干扰质粒,为进一步研究STAT6在哮喘发病机制中的作用,同时为哮喘治疗提供新的思路。