论文部分内容阅读
【摘要】生物实验教学是高中生物教学的重要内容，现就高中生物实验常用实验方法(化学物质的检测方法、实验结果的显示方法、实验条件的控制方法)和试剂(配制方法、作用)进行归纳总结。
【关键词】实验 方法 试剂
【中图分类号】G427
【文献标识码】A
【文章编号】1006——5962(2012)01(a)——0085——01
1 实验方法
实验方法是整个实验设计的精髓，是做好实验设计的关键所在。现将与高中生物实验有关的一些最常见的实验方法汇总如下：
1。1 化学物质的检测方法
淀粉碘液还原糖斐林试剂班氏试剂C02Ca(0H)2溶液或酸碱指示剂酒精酸性重铬酸钾蛋白质双缩脲试剂染色体龙胆紫、醋酸洋红溶液或改良苯酚品红染液脂肪苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液。
1.2 实验结果的显示方法
光合速率 O，释放量或CO，吸收量或淀粉产生量呼吸速率0，吸收量或C0，释放量或淀粉减少量原子途径
放射性同位素示踪法甲状腺激素作用动物耗氧量，发育速度等生长激素作用生长速度(体重变化，身高变化)胰岛素作用动物活动状态。
1.3 实验条件的控制方法
增加水中氧气 泵入空气或放入绿色植物减少水中氧气油膜覆盖或用凉开水除去容器中CO，NaOH溶液除去叶片中原有淀粉置于黑暗环境除去叶片中叶绿素
酒精隔水加热排除光合作用对呼吸作用的干扰给植株遮光线粒体提取细胞匀浆离心。
1.4 实验中控制温度的方法
还原糖鉴定：水浴加热酶促反应：水浴保温用酒精溶解叶中的叶绿素：隔水加热细胞和组织培养以及微生物培养：恒温培养。
2 高中生物实验涉及到许多重要试剂。药品，现将这些试剂。药品的配制和作用进行一下总结
2.1 斐林试剂
(1)配制：甲液质量分数为0.1g／m1，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml乙液质量分数0.05g／ml，取5gCuS04溶于蒸馏水，稀释至100ml。使用时将斐林试剂甲液和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液。(2)作用：鉴定还原性糖生成砖红色沉淀。
2.2 班氏尿糖定性试剂
(1)配制：称取17.4克无水硫酸铜(cuS04)溶解于100毫升热蒸馏水中，冷却后，稀释到1 50毫升。称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠(Na2C03)100克，加蒸馏水600毫升，加热使之溶解，冷却后，稀释到850毫升。把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中，搅匀后即为班氏尿糖定性试剂。(2)作用：用于尿糖的测定。
2.3双缩脲试剂
(1)配制：A液：质量浓度为0.1g／ml，取NaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml。B液：质量浓度为0.01g／ml，取lgCuS04溶于蒸馏水，稀释至100ml。使用时向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。(2)作用：鉴定蛋白质或多肽产生紫色反应。
2.4苏丹Ⅲ
(1)配制：取0.1g苏丹Ⅲ，溶解在20m195％酒精中(2)作用：鉴定脂肪，脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色。
2.5细胞解离液
(1)配制：质量分数为1 5％的盐酸和体积分数为95％的酒精溶液的混合液(1：1)。
(2)作用：用于洋葱根尖的解离，使组织中的细胞相互分离开来。
2.6 染色体染色剂 质量分数为0.01g／mL或0.02g／mL龙胆紫溶液(或醋酸洋红溶液)或改良苯酚品红染液
(1)配制：醋酸洋红染液的配制：取45毫升冰醋酸，加蒸馏水55毫升，煮沸后徐徐加入洋红1克，搅拌均匀后加入1颗铁锈钉，煮沸10分钟，冷却后过滤，贮存在棕色瓶内。
龙胆紫染液的配制：将1克龙胆紫龙胆紫溶解在质量分数为2％的醋酸溶液中配制而成。
改良苯酚品红染液的配制：母液A：取3g碱性品红，溶解在100ml的70％洒精。母液B：取母液A10ml，加入90ml的5％苯酚水溶液。母液c：取45ml的母液B，加入6ml冰醋酸和6ml 37％甲醛。改良苯酚品红：取2 10ml母液C，加入98 90ml的45％冰醋酸和1.8g山梨醇即可。一般在配制两周后染色能力显著增加。(2)作用：使细胞核内的染色体着色，便于观察。
2.7 层析液
(1)配制：由20份石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成。是一种脂溶性很强的有机溶剂。
(2)作用：分离叶绿体中的色素。色素在层析液中的溶解度不同：溶解度高的随层析液在滤纸上扩散很快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢，几分钟后不同种类的色素会分离开。
2.8碘液 (1)配制：取2gKI，溶解在5ml蒸馏水中，再加lgI，待溶解后用蒸馏水稀释至300ml。保存棕色瓶内。(2)作用：用来测定淀粉，淀粉遇碘后，形成紫色的复合物。
2.9 吡罗红 甲基绿染液
(1)配制：染色剂A液配制方法：取吡罗红甲基绿粉1 g，加入到100 mL蒸馏水中溶解，然后用滤纸过滤，将滤液放人棕色瓶中备用。染色剂B液的配制方法：B液是一种缓冲液，由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠16.4g，用蒸馏水溶解至1000mL备用；再取乙酸12mL，用蒸馏水稀释至1000mL备用。取配好的乙酸钠溶液30mL和稀释的乙酸20 mL，加蒸馏水50mL，配成pH为4.8的B液(缓冲液)。染色剂的配制：染色剂是由A液、B液混合配制而成的。取A液20 mL和B液80 mL混合，就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。(2) 作用：观察DNA和RNA在细胞中的分布。
2.10线粒体染色剂 健那绿染液
(1)配制：取0.5克健那绿溶解于50毫升生理盐水中，加热到30——40度使其充分溶解。
(2)作用：使线粒体染成蓝绿色。
【关键词】实验 方法 试剂
【中图分类号】G427
【文献标识码】A
【文章编号】1006——5962(2012)01(a)——0085——01
1 实验方法
实验方法是整个实验设计的精髓，是做好实验设计的关键所在。现将与高中生物实验有关的一些最常见的实验方法汇总如下：
1。1 化学物质的检测方法
淀粉碘液还原糖斐林试剂班氏试剂C02Ca(0H)2溶液或酸碱指示剂酒精酸性重铬酸钾蛋白质双缩脲试剂染色体龙胆紫、醋酸洋红溶液或改良苯酚品红染液脂肪苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液。
1.2 实验结果的显示方法
光合速率 O，释放量或CO，吸收量或淀粉产生量呼吸速率0，吸收量或C0，释放量或淀粉减少量原子途径
放射性同位素示踪法甲状腺激素作用动物耗氧量，发育速度等生长激素作用生长速度(体重变化，身高变化)胰岛素作用动物活动状态。
1.3 实验条件的控制方法
增加水中氧气 泵入空气或放入绿色植物减少水中氧气油膜覆盖或用凉开水除去容器中CO，NaOH溶液除去叶片中原有淀粉置于黑暗环境除去叶片中叶绿素
酒精隔水加热排除光合作用对呼吸作用的干扰给植株遮光线粒体提取细胞匀浆离心。
1.4 实验中控制温度的方法
还原糖鉴定：水浴加热酶促反应：水浴保温用酒精溶解叶中的叶绿素：隔水加热细胞和组织培养以及微生物培养：恒温培养。
2 高中生物实验涉及到许多重要试剂。药品，现将这些试剂。药品的配制和作用进行一下总结
2.1 斐林试剂
(1)配制：甲液质量分数为0.1g／m1，取10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml乙液质量分数0.05g／ml，取5gCuS04溶于蒸馏水，稀释至100ml。使用时将斐林试剂甲液和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液。(2)作用：鉴定还原性糖生成砖红色沉淀。
2.2 班氏尿糖定性试剂
(1)配制：称取17.4克无水硫酸铜(cuS04)溶解于100毫升热蒸馏水中，冷却后，稀释到1 50毫升。称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠(Na2C03)100克，加蒸馏水600毫升，加热使之溶解，冷却后，稀释到850毫升。把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中，搅匀后即为班氏尿糖定性试剂。(2)作用：用于尿糖的测定。
2.3双缩脲试剂
(1)配制：A液：质量浓度为0.1g／ml，取NaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml。B液：质量浓度为0.01g／ml，取lgCuS04溶于蒸馏水，稀释至100ml。使用时向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。(2)作用：鉴定蛋白质或多肽产生紫色反应。
2.4苏丹Ⅲ
(1)配制：取0.1g苏丹Ⅲ，溶解在20m195％酒精中(2)作用：鉴定脂肪，脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色。
2.5细胞解离液
(1)配制：质量分数为1 5％的盐酸和体积分数为95％的酒精溶液的混合液(1：1)。
(2)作用：用于洋葱根尖的解离，使组织中的细胞相互分离开来。
2.6 染色体染色剂 质量分数为0.01g／mL或0.02g／mL龙胆紫溶液(或醋酸洋红溶液)或改良苯酚品红染液
(1)配制：醋酸洋红染液的配制：取45毫升冰醋酸，加蒸馏水55毫升，煮沸后徐徐加入洋红1克，搅拌均匀后加入1颗铁锈钉，煮沸10分钟，冷却后过滤，贮存在棕色瓶内。
龙胆紫染液的配制：将1克龙胆紫龙胆紫溶解在质量分数为2％的醋酸溶液中配制而成。
改良苯酚品红染液的配制：母液A：取3g碱性品红，溶解在100ml的70％洒精。母液B：取母液A10ml，加入90ml的5％苯酚水溶液。母液c：取45ml的母液B，加入6ml冰醋酸和6ml 37％甲醛。改良苯酚品红：取2 10ml母液C，加入98 90ml的45％冰醋酸和1.8g山梨醇即可。一般在配制两周后染色能力显著增加。(2)作用：使细胞核内的染色体着色，便于观察。
2.7 层析液
(1)配制：由20份石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成。是一种脂溶性很强的有机溶剂。
(2)作用：分离叶绿体中的色素。色素在层析液中的溶解度不同：溶解度高的随层析液在滤纸上扩散很快；溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢，几分钟后不同种类的色素会分离开。
2.8碘液 (1)配制：取2gKI，溶解在5ml蒸馏水中，再加lgI，待溶解后用蒸馏水稀释至300ml。保存棕色瓶内。(2)作用：用来测定淀粉，淀粉遇碘后，形成紫色的复合物。
2.9 吡罗红 甲基绿染液
(1)配制：染色剂A液配制方法：取吡罗红甲基绿粉1 g，加入到100 mL蒸馏水中溶解，然后用滤纸过滤，将滤液放人棕色瓶中备用。染色剂B液的配制方法：B液是一种缓冲液，由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠16.4g，用蒸馏水溶解至1000mL备用；再取乙酸12mL，用蒸馏水稀释至1000mL备用。取配好的乙酸钠溶液30mL和稀释的乙酸20 mL，加蒸馏水50mL，配成pH为4.8的B液(缓冲液)。染色剂的配制：染色剂是由A液、B液混合配制而成的。取A液20 mL和B液80 mL混合，就是实验中所用的吡罗红甲基绿染色剂。(2) 作用：观察DNA和RNA在细胞中的分布。
2.10线粒体染色剂 健那绿染液
(1)配制：取0.5克健那绿溶解于50毫升生理盐水中，加热到30——40度使其充分溶解。
(2)作用：使线粒体染成蓝绿色。