【摘 要】
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目的: 获得表达小鼠IL -23 (mIL- 23 )基因的小鼠结肠癌细胞株。方法: 应用逆转录病毒载体, 将mIL -23基因导入小鼠结肠癌细胞株Colon26, 经G418筛选后获得表达mIL 23的阳
【机 构】
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河北医科大学第四医院科研中心河北省肿瘤基因诊断、预防和治疗重点实验室,河北医科大学第四医院科研中心河北省肿瘤基因诊断、预防和治疗重点实验室,河北医科大学第四医院科研中心河北省肿瘤基因诊断、预防和治疗重
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目的: 获得表达小鼠IL -23 (mIL- 23 )基因的小鼠结肠癌细胞株。方法: 应用逆转录病毒载体, 将mIL -23基因导入小鼠结肠癌细胞株Colon26, 经G418筛选后获得表达mIL 23的阳性细胞克隆(Colon26 /IL- 23)。用PCR和RT -PCR检测目的基因的表达, 用ELISA法检测mIL -23的产生及mIL- 23诱导的小鼠脾细胞IFN -γ的产生, 用MTT比色法检测Co lon26 /IL -23细胞和Colon26细胞的体外增殖。将Colon26 /IL- 23细胞接种于BALB/c小鼠的右侧背部皮下, 观察其致瘤性。结果: 建立了可表达mIL -23基因的小鼠结肠癌细胞株。分泌至培养上清中的IL -23, 可诱导小鼠脾细胞产生IFN- γ。在体外Colon26 /IL- 23细胞的生长与Colon26细胞无明显不同, 但其在体内的致瘤性下降, 具有抗瘤作用。结论: Colon26 /IL- 23细胞可分泌IL -23并证明其具有抗瘤活性。
Objective: To obtain mouse colon cancer cell line expressing mouse IL-23 (mIL-23) gene. Methods: The mIL-23 gene was transfected into mouse colon cancer cell line Colon26 by retroviral vector. After screening by G418, the positive clone (Colon26 / IL-23) expressing mIL23 was obtained. The expression of target gene was detected by PCR and RT-PCR. The production of mIL-23 and the production of IFN-γ in mouse splenocytes induced by mIL-23 were detected by ELISA. Co lon26 / IL-23 cells And Colon26 cells in vitro proliferation. Colon26 / IL-23 cells were inoculated subcutaneously in the right back of BALB / c mice to observe their tumorigenicity. Results: A murine colon cancer cell line that expresses mIL-23 gene was established. IL-23 secreted into the culture supernatant induced IFN-γ production in mouse spleen cells. The growth of Colon26 / IL-23 cells in vitro was not significantly different from that of Colon26 cells, but their in vivo tumorigenicity decreased and had anti-tumor effect. Conclusion: Colon26 / IL-23 cells can secrete IL-23 and demonstrate its anti-tumor activity.
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