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目的通过流式细胞仪(Flow Cytometer,FCM)检测急性脑梗死(Acute Cerebral Infarction,ACI)患者发病3d时外周血单核-巨噬细胞M1、M2表型,酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ElISA)检测患者血浆中IL-6及TGF-β的水平,探讨急性脑梗死患者早期外周血单核-巨噬细胞M1/M2的极化改变及其与临床预后的相关影响因素分析。方法1.纳入2019年1月-2019年8月在苏北人民医院神经内科住院治疗的急性脑梗死患者(ACI组)50例和同时期来院行健康体检者(对照组)20例为研究对象,收集两组的临床基线资料包括年龄、性别、BMI、吸烟史、饮酒史、高血压病史、糖尿病史、心房颤动史、冠心病史、入院NIHSS评分(ACI组)、梗死体积(ACI组)等。2.采集两组入院时的外周静脉血,常规检测血常规、尿常规、肝功能、肾功能、电解质、同型半胱氨酸、血脂序列、随机血糖、糖化血红蛋白、凝血常规、D-二聚体、C反应蛋白等;采用流式细胞仪检测ACI组发病3d时及对照组入院时外周血中单核-巨噬细胞M1、M2表型比例(M1表型为CD68+CCR2+,M2表型为CD163+CX3CR1+);并检测经典型(CD14++CD16-)、中间型(CD14++CD16+)和非经典型(CD14+CD16+)3种传统单核细胞表型比例;采用两独立样本t检验方法分析两组间M1、M2表型比例和M1/M2比值的差异,以及3种传统单核细胞表型的差异。3.将ACI患者根据NIHSS评分、梗死体积、TOAST分型分为多个亚组,采用方差分析比较各亚组间M1、M2表型比例和M1/M2比值差异。4.采用ElISA检测ACI组发病3d时及对照组入院时血浆中IL-6及TGF-β的水平,通过两独立样本t检验分析两组间IL-6及TGF-β水平的差异。5.对ACI组患者进行随访,评估3个月后的mRS评分,采用Pearson相关性分析研究M1/M2极化与患者临床预后的相关性;6.对ACI组患者进行回归分析,研究M1/M2极化与年龄、性别、BMI、吸烟史、饮酒史、高血压病史、糖尿病史、心房颤动史、冠心病史、入院时NIHSS评分、梗死体积、生化指标等的相关性。结果1.ACI患者发病3d时,外周血单核-巨噬细胞M1表型比例(2.92±0.37%)低于对照组(5.53±0.40%),差异有显著统计学意义(P<0.01);M2表型比例(12.56±1.61%)虽高于对照组(7.92±2.71%),但差异无统计学意义(P>0.05);M1/M2比值(0.26±0.07)低于对照组(0.88±0.32),差异有统计学意义(P<0.05)。2.发病3d的ACI患者亚组分析:⑴.根据NIHSS评分划分为轻型(NIHSS 0-7分)、中型(NIHSS 8-16分)、重型(NIHSS>16分)组,各亚组M1比例均低于对照组,其中轻型、中型组相较对照组差异有显著统计学意义(P<0.01);各亚组M2比例均高于对照组,差异较对照组均无统计学意义(P>0.05);各亚组M1/M2比值均低于对照组,且较对照组差异均有显著统计学意义(P<0.01);随着NIHSS评分升高,M1、M2比例均呈升高趋势,M1/M2比值呈先下降后升高趋势。⑵.根据梗死体积分为小梗死(0-5cm~3)、中梗死(5-50cm~3)、大梗死组(>50cm~3),各亚组M1比例均低于对照组,其中小梗死、中梗死组与对照组相比差异有显著统计学意义(P<0.01);各亚组M2比例均高于对照组,较对照组均无统计学意义(P>0.05);各亚组M1/M2比值均低于对照组,且较对照组差异均有显著统计学意义(P<0.01);随着梗死体积增加,M1、M2比例及M1/M2比值均呈先下降后升高趋势。⑶.根据TOAST分型分为大动脉粥样硬化型、心源性栓塞型、小动脉闭塞型、不明原因型组(其他明确原因型组0例,不参与统计分析),各亚组M1比例均低于对照组,除心源性栓塞组外较对照组均有显著统计学意义(P<0.01);除心源性栓塞组外,各亚组M2比例均高于对照组,其中大动脉粥样硬化型组及小动脉闭塞型组相较对照组有统计学意义(P<0.05);各亚组M1/M2比值均低于对照组,除心源性栓塞组外差异较对照组有显著统计学意义(P<0.01)。以上各亚组分析中,亚组间比较(不包含对照组)M1、M2比例以及M1/M2比值均无统计学意义。3.ACI患者发病3d时传统的单核细胞分型中,经典型比例(72.42±1.62%)低于对照组(76.90±2.12%),中间型比例(10.79±0.97%)低于对照组(12.96±1.61%),非经典型比例(4.84±0.49%)高于对照组(2.84±0.51%),但三种亚型相较对照组差异均无统计学意义。4.发病3d时ACI患者血浆IL-6水平(39.56±5.67pg/mL)高于对照组(9.23±4.37pg/mL),差异有显著统计学意义(P<0.01);TGF-β水平(123.12±23.42 pg/mL)高于对照组(41.21±13.14pg/mL),差异有显著统计学意义(P<0.01)。相关性分析示血浆IL-6水平、TGF-β水平与M1、M2及M1/M2间均无相关性。5.发病3d时ACI患者外周血单核-巨噬细胞M1比例与患者3个月后mRS评分呈正相关(r=0.487,P<0.05),M2比例以及M1/M2比值与患者3个月后mRS评分无相关性。6.多因素回归分析示:C反应蛋白(Beta=0.249,P<0.05)、同型半胱氨酸水平(Beta=0.432,P<0.01)与M1比例呈正相关;纤维蛋白原水平(Beta=0.248,P<0.05)与M2比例呈正相关;入院时随机血糖与M1/M2比例呈负相关(Beta=-0.304,P<0.05);但年龄、性别、BMI、吸烟史、饮酒史、高血压病史、糖尿病史、心房颤动史、冠心病史、入院时NIHSS评分及梗死体积等与M1、M2比例、M1/M2比值均未见相关性。结论1.急性脑梗死患者发病3d时外周血单核-巨噬细胞M1比例下降,M2比例升高,M1/M2极化向M2方向倾斜。随着神经功能缺损程度的增加,M1、M2比例均有升高趋势。心源性栓塞型脑梗死患者M1/M2极化改变不显著。2.急性脑梗死患者发病3d时血浆IL-6、TGF-β水平均显著升高,提示急性脑梗死早期炎症反应与抗炎效应共存。3.急性脑梗死患者发病3d时外周血单核-巨噬细胞M1比例与患者3个月不良预后呈正相关。4.急性脑梗死患者入院时C反应蛋白、同型半胱氨酸、纤维蛋白原、随机血糖水平与早期单核-巨噬细胞M1/M2极化相关。