NGF对大鼠脑出血后血肿周围细胞凋亡及Caspase-3表达的影响

来源 :泸州医学院 西南医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:silent511
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目的:观察脑出血后血肿周围神经细胞凋亡、Caspase-3和TNF-a的表达及其NGF对上述表达的影响,进一步阐明脑出血损伤机制及其可能的脑保护应对措施,并为早期应用NGF治疗脑出血提供实验理论基础。 方法:应用立体定向技术,将自体不凝血注人大鼠壳尾核制备脑出血模型,SD大鼠(n=60)随机分为正常组(n=5)、假手术组(n=5)、脑出血组(n=25)、NGF干预组(n=25),后两组按注血后断头取脑时间各分为6h、12h、24h、72h、1w 5个亚组,每亚组5只动物,全部动物采用4%多聚甲醛内固定后断头取脑、脱水、浸蜡、软石蜡包埋制成蜡块,连续切片作TUNEL染色和Caspase-3、TNF-a免疫组化染色,病理图文处理并照片观察,计数阳性细胞,结果用SPSS11.5统计分析。 结果:正常组、假手术组无TUNEL细胞和TNF-a阳性细胞表达,Caspase-3少量表达;脑出血组6h血肿周边组织出现TUNEL阳性细胞,72h达高峰,1w时仍有较高表达,Caspase-3在脑出血后6h表达开始增高,24h达到高峰,1w时基本降至正常水平,TNF-a在脑出血后6h开始表达,72h达高峰,以后下降较为缓慢,1w时仍有较高水平;脑出血后血肿周围TUNEL阳性细胞与Caspase-3的表达呈正相关(r=0.371,P=0.041<0.05),且Caspase-3的高峰时间早于凋亡的发生,与TNF-a表达呈正相关(r=0.928,P=0.001<0.05);应用NGF干预后自12h起各时间点TZJNEL细胞、Caspase-3和TNF-a表达均较脑出血组减少(P=0.012<0.05),以各自高峰时间最为显著(P=0.000<0.05),但未能改变TUNEL细胞、Caspase-3和TNF-a表达的高峰时间。 结论: (1)自体血注入法制作大鼠脑出血模型方法较为简单,成功率较高。 (2)脑出血后血肿周围细胞凋亡与Caspase-3和TNF-a的表达有关,两者通过不同的信号转导方式介导了细胞凋亡的发生。 (3)NGF能够有效的抑制脑出血后的细胞凋亡,可能与抑制了Caspase-3和TNF-a的表达有关,有望用于脑出血的治疗。
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