【摘 要】
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研究目的:探究新型微管抑制剂1-PD对视网膜新生血管的作用及其机制,为临床治疗视网膜新生血管提供可能的新靶点。研究方法:选取50只刚出生的C57BL/6J小鼠,随机分为空白对照组和实验处理组。首先按标准建立氧诱导小鼠视网膜病变模型（OIR）,实验组小鼠于出生后第12天行玻璃体腔注射新型微管抑制剂1-PD,对照组无处理。利用石蜡切片HE染色、CD31免疫组化观察实验组和对照组视网膜新生血管的情况,验
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研究目的:探究新型微管抑制剂1-PD对视网膜新生血管的作用及其机制,为临床治疗视网膜新生血管提供可能的新靶点。研究方法:选取50只刚出生的C57BL/6J小鼠,随机分为空白对照组和实验处理组。首先按标准建立氧诱导小鼠视网膜病变模型（OIR）,实验组小鼠于出生后第12天行玻璃体腔注射新型微管抑制剂1-PD,对照组无处理。利用石蜡切片HE染色、CD31免疫组化观察实验组和对照组视网膜新生血管的情况,验证新型微管抑制剂1-PD是否可以抑制视网膜新生血管。利用流式细胞检测技术、TUNEL实验验证新型微管抑制剂1-PD对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）凋亡的影响。用RT-PCR、Western Blot检测凋亡相关基因和蛋白表达,以探求新型微管抑制剂1-PD抑制新生血管的可能机制。研究结果:本文首先构建OIR模型后,通过视网膜石蜡切片HE染色发现,新型微管抑制剂1-PD处理后与对照组相比,突破视网膜内界膜的内皮细胞核数量明显减少,且未见明显管腔样结构;视网膜石蜡切片CD31染色显示:与对照组相比,实验组CD31阳性细胞明显较少,且未见明显管腔样结构。随后我们进一步探寻其机制,通过流式实验发现,实验组细胞凋亡率相比对照组明显上升;TUNEL结果显示:实验组凋亡细胞比例明显高于对照组。最后,通过RT-PCR和Western Blot实验发现,实验组细胞Bcl-2基因和蛋白表达同对照组相比均减少;实验组细胞Bax基因和蛋白表达较对照组均增多;同时实验组细胞Caspase9、Caspase3蛋白表达均增高。研究结论:新型微管抑制剂1-PD可诱导HUVECs凋亡,抑制视网膜新生血管,且可能是通过Bcl-2/Bax-Caspase9-Caspase3信号通路发挥作用。
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