苦苣菜水提物抗急性炎症活性及其机制研究

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  摘 要:探讨苦苣菜水提物对机体炎症相关通路的调节作用,并进行作用机制的分析。方法:将100只雄性小鼠運用在耳肿和足肿实验中,将其分成10组,每组10例,分别构成模型组,地塞米松阳性药物组,苦苣菜水提物高剂量组,苦苣菜水提物中剂量组,苦苣菜水提物低剂量组。对不同组别的血清和验证组织液的环氧化酶进行对照。结果:不同小组之间的耳肿和足肿呈现出明显的差异,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:苦苣菜水提物的抗炎效果可以进一步得到肯定,其可以在抗炎新药的研发中进行使用,在质量炎症性疾病中可以发挥较好的效果,值得在临床上应用。
  关键词:苦苣菜 水提物 抗炎
  苦苣菜也被称为苦菜,主要的活性成分是黄酮类,苦苣菜的提取物可以起到良好的降血糖的效果,其药理作用非常明显。近年来,医务人员进行了大量的实验,发现苦苣菜提取物具有良好的抑制耳肿和足肿的效果,可以有效的完善毛细血管的通透性,其抗菌和抗炎的效果可以得到保障。其在临床上也能与其他的中药结合,治疗肠胃炎、咽喉肿痛等症状。但是其抗炎机制比较复杂,需要进一步的研究,其涉及到抑制凋零的机制。
  一、仪器和材料
  1.主要仪器。本次研究主要采用高速冷松离心机和酶标仪,前者是由德国公司生产,后者是由意大利公司生产。并且采用我国生产的旋转蒸发仪和电热恒温水浴锅。
  2.主要试剂。本次研究采用的试剂主要有二甲苯分析纯,由永大化学试剂有限公司生产,角叉菜胶,由德国公司生产,酶联免疫吸附测定法试剂盒。苦苣菜是来自于内蒙古。
  3.实验动物。本次实验中选用100只小鼠,体重在20-22克不等,在2-3个月大,中国食品药品检定研究院提供,小鼠都没有其他的病种。将小鼠饲养,室温控制在23摄氏度左右,室内的湿度控制在40%,小鼠自由饮食和饮水,饲养一周后进行实验,在实验过程中小鼠的体重为35克左右。
  4.苦苣菜水提物的制备。将苦苣菜晒干并且剪碎,将原生药130克准备好,在水中浸泡30分钟,然后加入10倍的水,煎煮一个小时,然后将液体1收集,在加入适当的水,煎煮45分钟,得到滤液2,将两种滤液进行浓缩,形成100毫升的浓缩液体,进行冷却备用。
  5.分组和给药。采用随机分组的方式,将100个小鼠分成10组,5组进行耳肿实验,5组进行足肿实验。在两组实验中,应该采取不同的方式,分别构成模型组,地塞米松阳性药物组,苦苣菜水提物高剂量组,苦苣菜水提物中剂量组,苦苣菜水提物低剂量组。
  6.急性炎性模型的制备方法。如果小鼠是因为二甲苯导致的耳肿胀,在最后一次给药后,于半个小时后,在小鼠的右侧耳朵处涂抹100%二甲苯0.2毫升,导致炎症发生后罚个小时,采用脱颈椎的方式致使小鼠死亡,将小鼠的耳朵剪下,并采用打孔器在小鼠的耳朵处打下圆形的耳片,对其重量进行测定,对左耳朵和右耳朵的厚度差进行计算,就是肿胀度。
  如果小鼠是因为角叉菜胶导致的足肿胀,在最后一次给药半个小时后,在小鼠的右脚上注射1%的角叉菜胶,导致炎症发生,在5个小时后将小鼠采用断头的方式处死,减小小鼠的足部,对重量进行测定,小鼠左足和右足的重量差就是小鼠足部的肿胀度。
  7.炎性相关细胞因子和言行介质的含量测定。在进行血清测定的环节中,应该在室温内,确保血液自然凝固10-20分钟,每分钟转3000转,将液体收集,在-20摄氏度的冰箱内保存。在保存中如果发生了沉淀的问题,可以继续离心。
  在炎性组织液测定的环节中,将出现了足肿的小鼠的足部称重后,剪碎,将其放入0.9%3毫升的生理盐水中,确保其可以得到充分的浸泡。在-4摄氏度的环境下进行离心,每分钟转3000转,获取炎性组织液,保存在-20摄氏度的冰箱中。采用双抗体夹心法对血清和炎性组织液进行检测。
  8.统计学分析。采用SPSS 20.0软件进行相关数据的分析,采用表格表示计量记录,采用F检验进行多组间的比较,组内比较采用t检验的方式。
  二、结果
  1.苦苣菜水提物对二甲苯所致小鼠耳肿的影响。采用不同剂量的二甲苯导致小鼠耳肿的程度存在明显的差异,高剂量组的耳肿程度明显低于中剂量组,中剂量组的耳肿成本明显低于低剂量组。通过与模型组的对比,发现苦苣菜水提物具有一定的抑制小鼠耳肿的效果,而且随着给药剂量的提升,其抑制效果越来越好。
  2.苦苣菜水提物对角叉菜胶所导致小鼠足肿的影响。不同剂量的角叉菜胶导致小鼠的足肿程度不同,采用了高剂量的苦苣菜水提物后,小鼠的足肿程度低于采用中剂量的小鼠,采用中剂量苦苣菜水提物的小鼠的足肿情况好于使用低剂量苦苣菜水提物的小鼠的足肿情况。
  三、讨论
  在我国的药物学历史上,苦苣菜就常常被用作药物,在药学专著《神农本草经》和《本草纲目》中就有大量的记载,对苦苣菜的药理作用进行了深入的分析。苦苣菜的药性呈寒性,并且味道味苦,可以起到良好的清热解毒的效果,在肠炎和呕吐等症状中可以得到很好的应用。苦苣菜含有多种成分,主要是黄酮类,还含有很多人体所需的微量元素,起到良好的抗炎效果。
  本次研究分析二甲苯导致的小鼠耳肿和角叉菜胶导致的小鼠足肿的验证情况,通过本次的研究结果分析,苦苣菜提取物可以改善小鼠的耳肿和足肿的症状,随着苦苣菜水提物应用剂量的提升,小鼠的言行因子在下降。
  苦苣菜水提物具有良好的机体免疫效果,也能完善机体免疫病理损伤的效果,已经被人们重视起来。而且其在各类肿瘤性疾病中也得到应用。苦苣菜水提物的抗炎机制比较广泛,涉及到炎症发生过程的多个环节和炎症因子,具有多靶点作用和抗炎药物特征,符合现在抗炎有效药物的研究方向,在抗炎新药的研究中可以进行各类尝试,为炎性疾病的治疗提供更加合理的治疗方法。
  参考文献:
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