荔枝核总黄酮对活化大鼠肝星状细胞的增殖抑制作用及TLR4表达的影响

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目的:研究荔枝核总黄酮(TFL)在体外对活化的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)的增殖抑制作用及Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:使用转化生长因子β1(TGF-β1)(5 ng/ml)激活HSC-T6,显微镜下观察HSC-T6和激活的HSC-T6形态变化;CCK8试剂盒(CCK8)法观察TFL作用24h、48h、72h后活化的HSC-T6的增殖情况;RT-PCR检测HSC-T6中TLR4的表达;流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞凋亡。结果:1、显微镜下观察HSC-T6和激活的HSC-T6形态有明显变化;2、CCK8结果显示TFL可以抑制HSC-T6的增殖(P<0.01),并且随着TFL浓度和作用时间增加,HSC-T6增殖明显下降,具有浓度依赖性;3、RT-PCR结果显示随着TFL浓度增加,HSC-T6中TLR4表达下降,与实验对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);4、流式细胞仪检测结果表明TFL阻滞细胞于S期,G0/G1期细胞减少(P<0.01),S期细胞增加(P<0.01),促进细胞的凋亡(P<0.01),且具有浓度依赖性。结论:1、被TGF-β1诱导后活化的HSC-T6,与静息的HSC-T6细胞形状有明显变化,且TGF-β1可以促进细胞增殖。2、TFL通过降低TLR4在HSC-T6中的表达,阻滞HSC-T6细胞增殖和诱导HSC-T6细胞凋亡,达到抗肝纤维化效果。3、TFL浓度和作用时间增加,抑制HSC-T6增殖更加明显,抗肝纤维化的作用更加显著
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