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背景:子痫前期(PE)是妊娠时期常见的特发性疾病,是导致孕产妇和围产儿死亡的主要原因之一,严重危害母婴健康。其明确的发病机理至今仍未完全阐明。目前主要认为滋养细胞侵袭异常、炎性免疫失衡、血管生成障碍、血管内皮细胞损伤等机制可能具有重要的作用。内质网氨肽酶1(ERAP-1)属于锌指金属基质肽酶M1家族中的“催产素酶亚家族”,是蛋白水解酶中的氨肽酶,可参与MHC-I类分子的抗原呈递,在免疫调节中发挥作用。ERAP-1可分解血管紧张素II参与血压调节。此外,ERAP-1还可抑制VEGF从而抑制血管生成。国外研究表明:与血压正常的孕妇相比,子痫前期孕妇妊娠晚期蜕膜组织ERAP-1mRNA表达水平显著增加。目前,亚洲人群中ERAP-1与子痫前期的相关性尚未有文献报道。鉴于免疫因素和血管因素在子痫前期的发病机制中发挥重要作用,而ERAP-1又可调节免疫、血压以及抑制血管生成,以及国外的相关文献,推测ERAP-1可能参与子痫前期的发生。因此,探讨ERAP-1与子痫前期的关系,有助于进一步了解其发病机制。目的:本研究通过检测ERAP-1在子痫前期患者和正常足月妊娠孕妇胎盘组织中的表达变化,及缺氧环境下滋养细胞ERAP-1表达变化,探究ERAP-1在子痫前期发病中的作用,进一步解释子痫前期的发病机制。方法:(1)子痫前期患者胎盘组织研究:选择2016年09月~2018年09月住院分娩的24例子痫前期患者;另选同期正常足月妊娠孕妇24例作为对照。收集研究对象临床资料(妊娠天数、妊娠次数、血压、蛋白尿及新生儿体重等),并收集胎盘组织,应用实时荧光定量PCR技术、蛋白印迹法对子痫前期患者及对照组胎盘组织中ERAP-1的表达水平进行测定,免疫组化(IHC)鉴定ERAP-1的定位和表达,进行统计学分析。(2)细胞模型研究:细胞实验分为两组。实验组:采用2%氧浓度培养人滋养细胞株HTR-8/SVneo,模拟子痫前期的低氧状态;对照组:正常氧浓度下培养的滋养细胞株。分别在6h、12h、24h时间点收集两组细胞,利用实时荧光定量PCR技术检测ERAP-1 mRNA表达情况;分别在24h、48h、72h时间点收集两组细胞,利用蛋白印迹法检测ERAP-1蛋白表达情况。结果:1、子痫前期患者胎盘组织研究:(1)对选取的研究对象进行一般临床特征比较,子痫前期组与对照组在年龄、BMI、怀孕次数等方面差异均无统计学意义(P>0.05);在妊娠天数、收缩压、舒张压及新生儿体重等方面,差异均有统计学意义(P<0.01)。(2)实时荧光定量PCR提示子痫前期组胎盘组织ERAP-1基因mRNA的相对表达量(1.79±0.23)高于对照组(1.05±0.09),差异有统计学意义(P<0.01)。(3)蛋白印迹提示子痫前期组胎盘组织ERAP-1蛋白表达(1.08±0.12)高于对照组(0.62±0.04),差异有统计学意义(P<0.05)。(4)免疫组化提示子痫前期组胎盘组织ERAP-1蛋白主要表达在滋养层细胞,主要在细胞质有着色,而细胞核不着色,并且蛋白水平高于同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2、细胞模型研究:(1)缺氧条件下培养滋养细胞6小时后ERAP-1mRNA相对表达量(0.34±0.06),与对照组(0.92±0.10)相比较,ERAP-1 mRNA表达水平下降,差异有统计学意义(P<0.05)。但随着缺氧时间的延长,滋养细胞ERAP-1 mRNA表达逐渐升高,缺氧12小时后,缺氧组ERAP-1 mRNA相对表达量(0.83±0.06)已接近对照组表达水平。缺氧24小时后,缺氧组ERAP-1 mRNA表达(2.24±0.18)已明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)缺氧条件下培养滋养细胞24小时及48小时ERAP-1蛋白表达分别为0.55±0.03和0.58±0.07,与对照组(0.92±0.10)相比较,无明显差异(P>0.05)。但随着缺氧时间的延长至72小时,缺氧组ERAP-1蛋白水平(0.88±0.08)同对照组比表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:子痫前期患者胎盘组织ERAP-1mRNA及蛋白表达水平升高。缺氧条件下滋养细胞ERAP-1mRNA及蛋白表达水平升高,提示ERPA-1可能参与子痫前期的发病。