【摘 要】
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目的:研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在大鼠视网膜缺血-再灌注损伤模型中的作用及作用机制,从而探求缺血-再灌注损伤中视网膜神经保护的新方法。
方法:将SD大鼠随机分组
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目的:研究低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在大鼠视网膜缺血-再灌注损伤模型中的作用及作用机制,从而探求缺血-再灌注损伤中视网膜神经保护的新方法。
方法:将SD大鼠随机分组,钳夹视神经鞘,即夹闭视网膜中央动脉30秒后去夹闭,造成视网膜急性缺血-再灌注损伤模型,手术对照组仅打开结膜囊而不钳夹视神经鞘。分别于钳夹后2、4、8、12、24、48小时取大鼠视网膜,荧光TUNEL标记凋亡的神经元,real-timePCR及WesternBlot检测HIF-1α及其调控靶基因产物HO-1、P53及VEGF的表达,进一步检测视网膜超氧化物歧化酶-1(SOD-1)及抗凋亡基因Bc1-2的表达,免疫组化标记视网膜中表达的HIF-1α,GFAP标记视网膜中激活的Muller细胞。
结果:缺血-再灌注损伤后,随着时间的推移,在损伤后视网膜神经元的凋亡数量明显增多,24h达峰值,峰值后显著下降。HIF-1α的蛋白量呈现一个先高后低的趋势,损伤后12h达峰值;其下游调控基因产物HO-1、P53、VEGF的表达量均在损伤后升高,分别于8h、24h、12h达峰值,峰值后下降。与此对应,损伤后SOD-1及Bc1-2的表达即出现显著下降,SOD-1表达变化与HO-1趋于一致;Bc1-2表达变化与HO-1趋于一致,与P53趋于相反。免疫组化提示缺血-再灌注损伤后,HIF-1α表达量明显增多,主要分布于神经节细胞层、神经纤维层和内核层,损伤后GFAP表达增多,12h达峰值,提示M(u)ller细胞的激活。
结论:缺血-再灌注损伤后同时启动氧化应激反应和凋亡程序,对视网膜神经元和神经胶质细胞造成损伤,HIF-1α在调控这一过程中起了重要作用,损伤同时启动靶基因HO-1、P53、VEGF等,保护因子HO-1的激活缓解了氧化损伤并且抗凋亡。Müller细胞的胶质激活参与了这一过程的调节。
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