目的：研究大剂量甲氨喋呤化疗急性淋巴细胞白血病患儿肠道菌群的变化，并和健康儿童进行比较。从微生态的角度分析大剂量甲氨喋呤化疗与肠道菌群变化的相互关系。为微生态制剂用于大剂量甲氨喋呤化疗副作用的预防和治疗提供依据。并探讨荧光定量PCR技术在该领域应用的实用性和可行性，以便推广应用。 方法：收集36名大剂量甲氨喋呤化疗急性淋巴细胞白血病患儿及36名健康对照组儿童的粪便标本，并提取目标细菌DNA。应用细菌的16SrRNA/DNA序列设计大肠杆菌及乳酸杆菌的引物，行常规PCR完成细菌的定性，然后取准确定量的两种细菌DNA，经系列稀释后做荧光定量PCR，制作出标准曲线，待测样品同时进行荧光定量PCR反应，并和标准曲线进行比较，获得各样品中两种细菌的量。 结果：大剂量甲氨喋呤化疗急性淋巴细胞白血病患儿的肠道菌群与健康儿童比较发生了明显的变化，肠道乳酸杆菌数量的对数值(X lgx±Slgx)，患儿化疗前1天为8.10±0.43，化疗后第3天为6.73±1.45，化疗后第7天为7.45±0.43，对照组为9.12±0.50，经统计学处理有显著性差异(P<0.01)。而大肠杆菌数量的对数值，患儿化疗前1天为6.62±0.4，化疗后第3天为5.96±0.42，化疗后第7天为7.02±0.42，对照组为7.52±0.43，经统计学处理有显著性差异(P<0.01)。 结论：大剂量甲氨喋呤化疗急性淋巴细胞白血病患儿肠道中乳酸杆菌和大肠杆菌的数量较正常对照组明显减少。在大剂量甲氨喋呤化疗治疗过程中，采用微生态制剂，调整细菌比例，改善肠道内环境，使肠道内益生菌的数量尽快恢复正常。