【摘 要】
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本文在前期血红密孔菌漆酶基因在毕赤酵母中表达基础上,研究了重组漆酶对不同化学结构染料的脱色能力及固定化漆酶酶学性质。主要研究结果如下: 1.重组漆酶在无介体存在下
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本文在前期血红密孔菌漆酶基因在毕赤酵母中表达基础上,研究了重组漆酶对不同化学结构染料的脱色能力及固定化漆酶酶学性质。主要研究结果如下: 1.重组漆酶在无介体存在下只能对IC(靛红)有较好的脱色效果,介体的加入能显著提升染料脱色的速率和脱色程度,Syr是添加的所有介体中,导致漆酶脱色效果最明显的,靛红在Syr的介导下基本能完全脱色,而RBBR和RB5的脱色率也在60%以上。重组漆酶在酸性条件下对三种染料脱色效果较好。选取pH5.0做后续实验,漆酶在进行染料脱色时最适温度范围较宽,三种染料在20~60℃下都表现出较好的降解效果。通过正交试验得到三种混合染料脱色最优方案:RBBR浓度为100 mg/L、RB5浓度为40 mg/L、IC浓度为62.5 mg/L、粗酶液浓度为1 U/mL、介体浓度0.5 mM,混合染料在最优方案条件下脱色率达93%,显示出该重组漆酶在染料废水处理中具有较好的应用前景。 2.固定化重组漆酶在酸性条件下以ABTS作为底物时,最适pH为3.8,在不同pH下保存lh后酶活明显提高。此外,固定化酶在60℃下酶活最高,在20~60℃下保温1h后其酶活同样显著增加,说明固定化酶有较好的pH稳定性和热稳定性。二甲基亚砜对固定化酶活抑制最明显,Mn2+和Ba2+对固定化重组漆酶活性促进作用最为明显,而Na+、Li+和Hg2+对其有较小的抑制作用。固定化漆酶可在常温下保存12 d后依然保持51%漆酶活性。 3.固定后的重组漆酶在Syr存在下对RBBR、RB5和IC三种工业染料及模拟染料废水仍保持非常高的脱色率,固定化漆酶在对IC脱色重复循环使用了15次仍保持较高的脱色率,表明血红密孔菌重组漆酶经固定后在废水处理中有非常好的应用前景。
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