【摘 要】
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目的:观察艾灸“命门”穴治疗腹泻型肠易激综合征（diarrheapredominat irritable bowel syndrome,IBS-D）大鼠指标的变化,从“脑-肠-菌轴”途径探讨热敏灸治疗IBS-D的效应机制,为临床治疗提供部分实验依据。方法:40只健康雄性SD大鼠,适应性喂养1周,随机分为空白组（8只）和造模组（32只）。空白组正常喂养,不予干预。造模组予番泻叶煎汁灌胃,结合慢性不可
【基金项目】
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国家自然科学基金“基于BDNF-TrKB信号通路研究热敏灸干预IBS-D的效应机制”（NO:81960901）； 江西中医药大学创新创业课题“基于脑-肠-菌轴研究热敏灸命门穴治疗腹泻型肠易激综合征模型大鼠的机制”（NO:202110412142）；
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目的:观察艾灸“命门”穴治疗腹泻型肠易激综合征（diarrheapredominat irritable bowel syndrome,IBS-D）大鼠指标的变化,从“脑-肠-菌轴”途径探讨热敏灸治疗IBS-D的效应机制,为临床治疗提供部分实验依据。方法:40只健康雄性SD大鼠,适应性喂养1周,随机分为空白组（8只）和造模组（32只）。空白组正常喂养,不予干预。造模组予番泻叶煎汁灌胃,结合慢性不可预见性刺激,建立IBS-D模型,共21 d。造模成功后,将造模组随机分成模型组和艾灸组。艾灸组悬灸“命门”穴,1次/d,40 min/次,共14 d。艾灸过程中同时检测大鼠尾温变化,分别于艾灸前5 min、艾灸过程中的第5、10、15、20、25、30、35、40 min时分别测量大鼠尾巴距尾根1/3处温度,共测量9次。模型组不予干预。干预后,根据大鼠尾温变化,把艾灸组分成热敏灸组和非热敏灸组。观察干预前后各组大鼠一般状况变化,体质量变化,行为学变化,内脏敏感性变化。干预结束后取材,采用苏木精-伊红染色法（Hematoxylin-eosin staining,HE染色法）观察结肠组织形态,免疫组化法检测结肠组织中活性调节的细胞骨架蛋白（activity regulated cytoskeletal protein,arc）和细胞同源fos蛋白（cellular homologous fos protein,c-fos）的含量,荧光定量PCR法检测海马组织中arc、c-fos的含量,16S r RNA法检测粪便中微生物变化。结果:（1）造模后,造模组表现为成群蜷缩在角落,神形倦怠,毛发枯槁,粪便为不成型的稀便。干预后,模型组表现同干预前无明显差异,热敏灸组和非热敏灸组表现均得到改善,且热敏灸组的一般状况较非热敏灸组稍好。（2）造模后,与空白组比较,造模组体质量增长缓慢（P＜0.01）。干预后,与模型组比较,热敏灸组、非热敏灸组体质量均明显增长（P0.01）。与非热敏灸组比较,热敏灸组体质量明显增长（P＜0.05）。（3）造模后,与空白组比较,造模组旷场试验总得分明显下降（P＜0.01）。干预后,与空白组比较,模型组旷场试验总得分明显下降（P＜0.01）;与模型组比较,热敏灸组、非热敏灸组旷场试验总得分均明显增加（P＜0.01）;热敏灸组与非热敏灸组之间进行比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。（4）造模后,与空白组比较,造模组结肠注水量显著减少（P＜0.01）。干预后,与空白组比较,模型组结肠注水量下降（P＜0.01）;与模型组比较,热敏灸组与非热敏灸组结肠注水量均显著增加（P＜0.01）;热敏灸组与非热敏灸组间结肠注水量无明显差异（P＞0.05）。（5）干预后,与空白组比较,模型组结肠中arc、c-fos的含量均升高（P＜0.01）;与模型组比较,热敏灸组与非热敏灸组均明显降低（P＜0.01）,且热敏灸组低于非热敏灸组（P＜0.01）。（6）干预后,与空白组比较,模型组海马组织中arc、c-fos的含量明显升高（P＜0.01）;与模型组比较,热敏灸组与非热敏灸组均降低（P＜0.01）;但热敏灸组与非热敏灸组进行比较差异无统计学意义（P＞0.05）。（7）干预后,各组大鼠肠道内微生物的多样性并无明显差异（P＞0.05）,但实际上空白组、模型组、热敏灸组和非热敏灸组之间肠道内微生物的种类并不完全一样。各组大鼠肠道菌群之间的构成比发生了改变:在门水平上,与空白组比较,模型组中厚壁菌门的含量下降,拟杆菌门的含量升高;与模型组比较,热敏灸组与非热敏灸组中厚壁菌门的含量升高,拟杆菌门的含量降低;与非热敏灸组比较,热敏灸组中厚壁菌门的含量更高,拟杆菌门的含量更低。在属水平上,与空白组比较,模型组中普氏菌属、瘤胃球菌属、帕拉普氏菌属、拟杆菌属的含量增加,而乳酸菌属、颤螺旋菌属、氏菌属的含量则减少;与模型组比较,热敏灸组和非热敏灸组中乳酸菌属、普氏菌属、瘤胃球菌属、帕拉普氏菌属、拟杆菌属、氏菌属的含量均下降,而颤螺旋菌属、氏菌属的含量则增加;与非热敏灸组比较,热敏灸组中帕拉普氏菌属的含量降低。结论:（1）热敏灸能明显改善IBS-D大鼠一般状况、增加其体质量、增加行为学得分、降低其内脏敏感性。（2）热敏灸能有效降低结肠及大脑海马组织中arc、c-fos的含量,调整肠道菌群的结构,调节“脑-肠-菌轴”,这可能是热敏灸治疗IBS-D的机制。
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