【摘 要】
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目的：通过体外实验观察丁苯酞（NBP）对脂多糖(LPS)和过氧化氢（H2O2）诱导的血管内皮细胞（HUVECs）炎症损伤和氧化应激损伤的保护作用，探讨动脉粥样硬化的发生机制。 方法：体外培养人脐
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目的：通过体外实验观察丁苯酞（NBP）对脂多糖(LPS)和过氧化氢（H2O2）诱导的血管内皮细胞（HUVECs）炎症损伤和氧化应激损伤的保护作用，探讨动脉粥样硬化的发生机制。 方法：体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)。（1）LPS100ng/mL用于建立炎症损伤模型。以不同浓度丁苯酞（0.1、1、10、100uM）预孵育细胞。运用四唑蓝比色分析法（MTT法）检测不同浓度丁苯酞及LPS刺激后HUVECs的细胞活性；Real-time PCR检测各组IL-6、IL-8、TNF-α及HMGB1 mRNA的表达水平；Western-bolt检测各组培养上清液中HMGB1蛋白的含量。（2）MTT法筛选合适的H2O2浓度用于建立氧化应激损伤模型；用筛选出的H2O2浓度诱导细胞，以不同浓度丁苯酞（0.1、1、10、100uM）预孵育细胞，MTT法检测细胞活性；硫代巴比妥酸法（TBA法）检测细胞内MDA的含量。 结果：（1）不同浓度丁苯酞及加入LPS刺激后HUVECs细胞活性无明显变化；LPS刺激HUVECs后炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α、HMGB1 mRNA的表达和HMGB1蛋白释放水平增加；丁苯酞可在一定范围内呈浓度依赖性下调LPS诱导的IL-6、IL-8、TNF-αmRNA的表达，降低LPS诱导的HMGB1的mRNA表达和蛋白释放。（2）H2O2刺激后细胞活性下降；丁苯酞在一定范围内呈浓度依赖性增加H2O2诱导的HUVECs细胞活性；H2O2刺激后细胞内MDA的生成量增加，丁苯酞可抑制H2O2诱导的MDA的生成。 结论：（1）LPS可诱导IL-6、IL-8、TNF-α、HMGB1的表达和HMGB1的释放，促进AS的发生发展。（2）H2O2可诱导内皮细胞脂质过氧化，还可将LDL修饰成为ox-LDL，进而诱导炎症反应，促进AS发生发展。（3）丁苯酞对LPS和H2O2诱导的血管内皮细胞损伤具有保护作用，其保护作用可能与降低炎性因子的表达和释放，抑制脂质过氧化有关。
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