重叠延伸PCR相关论文
目的：基于重叠延伸PCR （SOE PCR）技术构建转录因子EB （TFEB）丝氨酸114位点突变体原核表达质粒，并进行体外诱导表达和纯化。方法：根据SOE P......
PCR技术是现代分子生物学研究中最常用的技术，自1986年发明至今，在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多新PCR技术，本文对5种常用PCR技......
萜类化合物是自然界中分布最广的一类天然产物家族,目前已发现有5万多种。萜类化合物有共同的合成前体异戊烯基焦磷酸(IPP)与二甲......
大白菜(B.rapa L.ssp.pekiensis)起源于中国,是我国重要的蔬菜作物之一。病毒病是大白菜生产中的三大病害之一,严重影响了大白菜的......
猪囊尾蚴病是猪肉绦虫的幼虫(猪囊尾蚴)寄生于猪的肌肉和其他器官中所引起的一种寄生虫病,又称猪囊虫病。是一种散发性、传染性寄......
本研究以PPV VP2为基础,通过定点突变的方法研究了Cys在VLPs高级结构和免疫原性中的作用,旨在寻找利于外源基因插入的位点,为以PPV......
山羊关节炎—脑炎（CAE）是由反转录病毒科慢病毒属山羊关节炎脑炎病毒（CAEV）引起的山羊的慢性传染病，CAEV可引起潜伏感染并呈世界性分布，......
目的：克隆C57BL/6小鼠重组甘丙肽基因，构建其过表达转基因载体，为制作转基因动物奠定实验基础。
方法：用聚合酶链式反应(polymera......
木聚糖酶能将木聚糖降解为低聚木糖和少量木糖。在饲料、食品和造纸行业等都有极大地应用前景。现在商业应用的木聚糖酶大部分都是......
利用基因重组技术,分别克隆木薯SBEⅠ基因ORF中的494 bp的片段和SBEⅡ基因ORF中的340 bp的片段;并通过重叠延伸PCR方法,扩增融合SB......
目的以磷酸酰肌醇蛋白聚糖-3蛋白(glypican-3,GPC3)的CTL表位EYILSLEEL替换HBsAg中内源性CTL表位LLD,构建用于预防和治疗乙肝的DNA......
根据OC-1△D86基因序列.设计合成了7条寡核苷酸片段.通过重叠延伸PCR技术合成了OC-I△D86基因,利用设计好的BamH1/Xho I酶切位点将......
背景与目的:构建UGRP1基因启动子的定点突变表达载体.材料与方法:以插入UGRP1基因正常启动子的质粒pGL3-UGRP1(-112G)为模板,用重......
目的构建mBD2与mBD3融合基因的真核表达载体,检测其在MDCK细胞中的表达情况,并探讨其抗病毒特性。方法利用PCR方法分别扩增mBD2与m......
目的:构建IFN-β信号肽序列与白细胞介素18(IL-18)成熟肽的重组嵌合分子.方法:从BALB/c鼠基因组DNA扩增IFN-β信号肽序列;由小鼠Pr......
以微小隐孢子虫基因组DNA为模板,PCR扩增获得子孢子表面抗原CP15、P23和CP15/60基因.利用重叠延伸PCR(SOE PCR)将该3段基因片段串......
目的:构建cblN/Zap嵌合分子, 稳定转染Jurkat细胞后观察对细胞TCRζ的影响.方法: 提取Jurkat细胞的总RNA并反转录为cDNA, 以其作为......
目的:合成人β防御素4(HBD4)基因并构建其克隆载体.方法:根据GenBank中HBD4结构基因的序列, 设计合成了6条长度为32 ～60 bp的寡聚核......
基于对人类肥胖病的研究,推测肥胖基因可能是影响家畜脂肪沉积的一个重要候选基因.研究以藏猪为实验材料,利用重叠延伸PCR方法合成......
目的 克隆表达出能够抑制补体活化的双功能域小分子补体受体1型(complementreceptor type 1,CR1)衍生物.方法 从外周血提取总RNA,......
在功能基因组学时代,对基因的功能研究将涉及到大量的载体构建,为建立一种链霉菌外源基因多拷贝表达的载体构建方法,本研究采用重......
为探索治疗禽流感的方法,本实验从免疫H5N1亚型禽流感疫苗的猕猴淋巴细胞中提取总mRNA并扩增重链和轻链可变区（VH、Vλ和Vκ）,用重叠......
为获得具有良好抗原性的日本血吸虫重组蛋白,本研究设计了两对特异性引物,以日本血吸虫mRNA为模板,RT-PCR方法分别克隆基因片段Sj2......
[目的]对米黑根毛霉脂肪酶基因的密码子进行优化，并采用重叠延伸PCR合成设计的基因序列。[方法]根据毕赤酵母（Pichiapastoris）密码子......
目的：建立一种简便快速的重叠延伸PCR基因定点突变方法。方法：采用重叠延伸PCR的方法将人TGF-β2基因启动子区（-270bp～＋280bp）-114bp的5C......
目的:将L-门冬酰胺酶抗原表位区域的两个肽段作为突变对象,构建9个突变体,并对其酶活力和蛋白表达量与原酶进行比较研究.方法:根据......
通过重叠延伸PCR将宇佐米曲霉中1347bp的酸性蛋白酶基因pepa与黑曲霉糖化酶基因5＇同源臂和3＋同源臂进行拼接，构建pepA基因表达框。将......
目的构建干扰素8启动刺激因子1（IPS-1）的300～444位氨基酸缺失突变体重组质粒，并初步鉴定。方法通过重叠延伸PCR法获得缺失300～444位氨基......
为获得适合转化百合的双价RNAi表达载体,以感病百合叶片的总RNA为模板,分别扩增400bp左右的LSV和LMoVCP基因。通过重叠延伸PCR技术......
目的采用基因工程的手段研制人Osteostat胞外蛋白，通过大肠杆菌偏嗜性人Osteostat胞外段编码基因的克隆，为重组蛋白的研发作初步准备......
目的：构建小鼠β-防御素2（mBD2）与甲型流感病毒A／PR／8／34（H1N1）血凝素（HA1）基因融合表达的真核载体，并检测其在HEK293细胞中的表达。方法：用PCR......
目的：为了研究p53codon72多态的功能,采用定点诱变法构建人p53基因的多态质粒。方法：设计带有突变碱基的引物,通过PCR扩增引入突变碱......
目的 构建CblN／Grb2嵌合分子，表达和纯化GST-CblN／Grb2融合蛋白，并考察嵌合分子CblN／Grb2在体外是否具有泛素连接酶活性。方法 提取SKBR......
本研究利用重叠延伸PCR 的方法成功获得蓖麻蚕两个β-FFase 基因ScSuc1和ScSuc2全长ORF，为今后研究ScSuc1和ScSuc2的体外表达以及分......
本研究旨在体外重建鸡主要组织相容性复合体Ⅰ类分子（MHCⅠ）重链（α链）胞外区与轻链（β2m）成熟肽的重组嵌合分子。采用RT—PCR法分别扩增......
为了研究高效广谱的猪基因工程抗病毒制剂，作者采用重叠延伸PCR（Splieing by overlap extension-PCR，SOE-PCR）方法通过-基因柔性接头（1i......
目的：克隆小鼠鸟氨酸脱羧酶抗酶2（OAZ2）功能基因，原核表达、纯化OAZ2蛋白并制备抗OAZ2多克隆抗体。方法：RT-PCR法从鼠黑色素瘤细胞总RNA......
目的：构建含有不同组合细胞培养适应性突变的丙型肝炎病毒（HCV）全长基因组cDNA。方法：根据HCV全长基因组cDNA序列及突变位点设计引物，运......
构建了野生型和突变型CD59重组质粒，建立了高效真核表达系统，探讨了W40位点的生物学活性。采用基因点突变技术使CD59W40基因位置缺失......
由于传统的磷酸化补齐方法对于重复序列较高的基因的合成困难较大,建立一种用于克隆全长基因的重叠延伸法并获得了成功,对全长基因......
为了验证SOE-PCR技术在洛伐他汀九酮合成酶基因（LOVB）克隆中的应用,以土曲霉基因组DNA为模板,设计4对引物,分别扩增LOVB的4个外显子,......
目的：利用重叠延伸PCR技术纠正人工合成乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）基因中的突变碱基。方法：针对构建的重组质粒PGEM-7Z／HBcAg中的两处......
作者将猪IκBα基因32、36位丝氨酸位点突变为丙氨酸,为进一步研究突变型IκBα蛋白对异种移植延缓性排斥反应的抑制机理奠定基础......
目的应用降落和重叠延伸PCR法构建对肿瘤干细胞有特异靶向性的高效载体-复制缺陷型腺病毒载体,观察其对CD133＋人大肠癌细胞株SW480......
为了研究AtWUS基因在橡胶树胚性易碎愈伤组织中的表达对体细胞胚发生的生物学作用，用构建的根癌农杆菌EHAl05（携带pCAMBIA2301—35S．A......
构建重组人ICOS胞外区原核表达载体,并进行初步表达。根据GenBank基因库中ICOS胞外区基因序列设计引物,用RT-PCR法从人T淋巴瘤细胞......
通过重叠延伸PCR扩增IL2-VP2串联基因,克隆到pMD18-T载体上,亚克隆正向插入到毕赤酵母表达质粒pPICZαA中,经PCR和双酶切鉴定表明......
在细胞或小鼠中使用Cre重组酶（Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶）条件性地删除或修饰基因是不可逆的,基因删除后蛋白......
采用重叠延伸PCR技术（gene splicing by overlap extension PCR,简称SOE PCR）,通过连接多肽FMDV2A序列将CryIA（c）和gna基因相融合,得到......
