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研究背景：
糖尿病是一种以慢性高血糖为特征的代谢性疾病。糖尿病患者与正常人相比，不仅具有慢性高血糖，而且血糖波动幅度增大。过去一直认为慢性高血糖是引起慢性并发症的重要原因，但近年的研究表明血糖波动可能比慢性高血糖危害大，血糖波动可通过炎症和氧化应激损伤内皮细胞，促进大血管病变的发生。2型糖尿病患者(type2 diabetes mellitus，T2DM)死亡的首要原因是大血管并发症——心脑血管疾病，其血糖波动主要由餐后高血糖引起，而餐后高血糖是心血管疾病的高危因素，因而血糖波动对T2DM患者大血管并发症的危害可能更大。
抵抗素(resistin)是一种富含半胱氨酸的分泌性蛋白，在啮齿类动物主要由脂肪组织特异表达，与胰岛素抵抗有关。人类抵抗素主要由单核/巨噬细胞表达，与胰岛素抵抗的关系不明确，但与炎症和动脉粥样硬化密切相关。抵抗素不仅通过外周血单核细胞分泌入血，还通过动脉粥样斑块内巨噬细胞旁分泌，作用于血管内皮细胞导致功能损伤，促进动脉粥样硬化的发生发展。
人抵抗素在单核细胞表达，且向巨噬细胞分化时表达增加。血糖波动促进炎症因子释放，炎症则促进单核细胞的分化引起抵抗素表达增加，而且炎症还可通过激活NF—κB途径促进抵抗素的表达和分泌，因而推测血糖波动可能促进单核/巨噬细胞的抵抗素表达和分泌，引起血中抵抗素水平升高。研究发现T2DM和冠状动脉粥样硬化性心脏病患者的白细胞总数增多，提示了非特异性炎症可引起白细胞增多。血糖波动时炎症因子释放增加，可能引起白细胞增多，而单核细胞增多则可引起抵抗素的分泌增加，导致血中抵抗素水平升高，从而诱导内皮功能紊乱，参与血糖波动对大血管的损伤过程。但是血糖波动对抵抗素的影响未见报道。
本课题选取不同糖耐量人群口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test，OGTT)中血糖都能达到一个较高水平的1h作为观察点，通过比较OGTT1h与0h血糖的差值来评估血糖波动，观察不同血糖波动对血清抵抗素水平和单核细胞的影响，探讨血糖波动是否促进血抵抗素水平升高、以及血糖波动是否通过单核细胞增多，引起抵抗素分泌增加，导致血清抵抗素水平升高。抵抗素的表达及分泌受多种因素影响，为了排除体内多种因素的干扰，本研究选择人U937单核/巨噬细胞，进行体外干预，比较间歇性高糖和持续性高糖对单核/巨噬细胞抵抗素分泌的影响。本研究从体内、外两方面来探讨血糖波动对抵抗素的影响，旨在探讨抵抗素是否参与了血糖波动对大血管病变的损伤机制。
研究目的：
探讨血糖波动对抵抗素的影响。
研究内容：
1.临床研究
1.1.比较不同糖耐量人群的血糖波动幅度，观察不同血糖波动对血清抵抗素水平的影响；
1.2.观察不同血糖波动对单核细胞的影响，分析单核细胞与血清抵抗素水平的关系。
2.细胞学研究：比较间歇性高糖和持续性高糖对人U937单核/巨噬细胞抵抗素分泌的影响。
研究方法：
1.临床研究
根据OGTT试验结果，按1999年WHO糖尿病诊断和分型标准进行分组，入选糖耐量正常者30例(NGT组)，糖耐量受损者31例(IGT组)和新诊断2型糖尿病患者32例(T2DM组)，年龄46.57±10.55(30～67)岁，均来自中山大学附属第二医院内分泌科门诊和体检中心。排除已接受任何抗高血糖治疗或合并糖尿病急性并发症者，以及白细胞总数≥10×109/L或合并各种急性感染性疾病者。所有研究对象收集基本临床资料，进行OGTT试验，检测0h、1h和2h血糖，并收集0h和1h静脉血检测抵抗素水平，血清抵抗素测定采用酶联免疫吸附法(美国R&D公司试剂盒，检测值范围为0.026-10ng/mL，敏感度为0.01-0.055ng/mL，批内及批间差异均小于10％)。其中32例研究对象同时留取0h和1h静脉血，检测单核细胞数量。单核细胞数量采用全自动五分类血球分析仪检测(东亚SYSMEX公司)。
2.细胞学研究
选择人淋巴瘤U937细胞作为研究对象，在RPMI1640培养基(含10％胎牛血清，3％谷氨酰胺，100IU/mL青霉素，100ug/mL链霉素)，37℃，5％CO2条件下培养。200ng/mL佛波酯(PMA)诱导24h后，贴壁伴形态改变的U937细胞即为分化成熟的单核/巨噬细胞，调整细胞密度为5×106/mL接种在12孔板，在无PMA的培养基中培养24h后进行干预。分为对照组(11.1mmol/L葡萄糖)，持续性高糖组(22.2mmol/L葡萄糖)和间歇性高糖组(以上两种浓度每6h交替)，三组均每6h进行换液，共干预3d。收集最后6h的培养上清液测定抵抗素水平，每种条件重复4次。抵抗素分泌水平测定ELISA法(美国ADL公司试剂盒，批内和批间变异系数均小于10％，检测值范围为0-240pg/mL，敏感度为0.1 pg/mL)。
3.统计分析
所有计量资料均进行正态性检验，正态分布数据以均数±标准差表示，非正态数据用中位数表示，进行对数转换后再进行统计。三组间比较采用单因素方差分析，两两组间比较采用LSD—t检验；组内比较采用配对t检验；相关分析采用Pearson法；显著性水准为p<0.05。统计软件采用SPSS13.0系统。
结论：
1.T2DM患者血糖波动幅度增大，血清抵抗素升高幅度也增大。
2.间歇性高糖促进人U937单核/巨噬细胞抵抗素的分泌。