背景:缺血性脑血管病发病后恢复脑血流是治疗脑血管病最关键的方法,但再灌注后可加重缺血脑血管的损伤,这种损伤以凋亡为主,因此减少缺血再灌注后神经元凋亡为重要的脑保护机制。HS1相关蛋白X-1(HS1-associated protein X-1,HAX-1)是Src酪氨酸激酶的底物HS1(hematopoietic cell-specific Lyn substrate 1, HS1)相互作用的蛋白质。近年来的研究发现,HAX-1可以和多种蛋白相互作用,具有强大的抗凋亡功能。已有报道HAX-1在皮肤、心肌等组织中具有抗凋亡作用,但对于脑缺血后脑组织的HAX-1表达变化与神经元凋亡的关系尚未见报道,鉴于此,我们以大鼠全脑缺血再灌注为模型,观察缺血再灌注后不同时相后,皮质组织中HAX-1蛋白的表达水平变化,探讨HAX-1蛋白与缺血再灌注诱导的神经元凋亡之间的关系。旨在为缺血性神经元神经元损伤的干预提供实验依据,为开发治疗药物提供有价值的线索。目的:以大鼠全脑缺血再灌注为模型,观察缺血再灌注后不同时相后,皮质组织中HAX-1蛋白的表达水平变化,探讨HAX-1蛋白与缺血再灌注诱导的神经元凋亡之间的关系。方法:采用Pulsinelli 4血管法进行改良,制作大鼠全脑缺血再灌注动物模型。将大鼠随机分为正常组和全脑缺血15min再灌注6h、24h、48h、72h组,每组5只。通过HE染色,观察大鼠组织形态学变化情况,采用免疫双标法检测大鼠皮质在缺血再灌注不同时间HAX-1的表达,TUNEL法检测大鼠大脑皮质神经细胞凋亡情况,免疫组化ABC法检测大鼠皮质在缺血再灌注不同时间Caspase-3的表达。结果:(1)HE染色镜下所见:正常组脑组织结构清晰,细胞排列规则,细胞轮廓正常,细胞核居中,核仁清楚。缺血再灌注后72h组可见神经细胞肿胀,局灶性细胞核固缩。(2)HAX-1蛋白在缺血后大脑皮质6h表达最高(37.60+3.45),24h、48h、72h降低,分别为(11.40±1.14)、(10.40±1.52)、(9.80±1.30),且低于正常水平N(19.20±1.79)((P<0.01)(3)正常组有少量活化的Caspase-3蛋白表达,缺血6h组其表达水平显著高于正常组,并随着缺血时间的延长呈逐渐递增的趋势。N(35.40±7.96)、6h(72.80±5.49)、24h(106.2±6.91)、48h(129.00±19.74)、72h(166.20±15.32),P<0.01。(4)全脑缺血再灌注后随着时间的延长皮质神经元的凋亡数目逐渐增加,N(51.00±18.38)、6h(92.00±9.06)、24h(133.80±10.64)、48h(157.00±10.83)、72h(187.80±14.96), P<0.01。结论:全脑缺血再灌注后皮质神经元中HAX-1蛋白在短期缺血中表达升高,可能参与神经元的抗凋亡,随着缺血时间延长,其表达水平降低,与神经元的凋亡增强相关。干预HAX-1可能可以作为缺血再灌注损伤神经元保护的干预靶点。